24小时热门版块排行榜    

查看: 1873  |  回复: 4
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

小蚂蚁吃木头

铜虫 (初入文坛)


[交流] 【求助】真核基因在原核生物表达

基因工程老师要求做一套从基因选择、到质粒选取、到细胞选取转入、筛选手段、到表达蛋白纯化的PPT,现在暂时没有什么想法,哪位做过的给个方向,谢谢。如果有详细的过程那就更好的了。我是本科菜鸟,大家多多指教。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
你可以做这个PPT:
土壤样品宏基因组DNA的提取
DNA与克隆质粒pWEB:TNC连接
转化/转染大肠杆菌DH5alpha克隆宿主构建文库
平板检测纤维素酶活性
纤维素酶基因的亚克隆
纤维素酶基因与表达载体pET30连接转化克隆宿主大肠杆菌JM109
pET30转化表达宿主大肠杆菌BL21(DE3)
蛋白质诱导表达
重组蛋白质的提取(超声波破碎细胞)
重组蛋白质的尿素复溶和镍柱纯化(SDS-PAGE电泳检测蛋白质纯度)
重组蛋白质的离子交换层析柱纯化(SDS-PAGE电泳检测蛋白质纯度)
重组蛋白质酶学特性测定及分析

这样,你就能得满分了。
4楼2011-07-21 20:02:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答
楼主可以参考一下NOVAGEN的手册,包括全套过程。
2楼2011-04-16 22:38:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
上面提到的基因很可能是原核生物的,但是为什么你老师要你选择真核基因在原核生物中表达?真核生物和原核生物是不同的,在原核生物中糖基化少,很可能得不到理想的真核生物基因表达的蛋白质,这样一来可能跟在这个基因本来的生物中表达的结果有性质差异,你问问你老师看能不能改成原核生物基因在原核生物中表达,感觉更靠谱些。

要是实在是改不了,那你再跟帖说明。
5楼2011-07-21 20:11:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +13 archvillain 2026-08-15 25/1250 2026-08-16 20:13 by zhaosm1982
[基金申请] 2027广东省杰青 +3 奶牛小黑 2026-08-15 6/300 2026-08-16 20:07 by 奶牛小黑
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +3 Tide man 2026-08-14 3/150 2026-08-16 17:47 by jurkat.1640
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +9 Ldrop2023 2026-08-13 9/450 2026-08-16 13:24 by wukun_007
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +11 家与远方 2026-08-10 16/800 2026-08-16 10:28 by ray43
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +6 wangze12014 2026-08-14 7/350 2026-08-15 20:12 by gltch
[基金申请] filecode +8 cratir 2026-08-14 12/600 2026-08-15 18:08 by zyfgau
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +12 Tide man 2026-08-10 13/650 2026-08-15 16:34 by 氺木
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
信息提示
请填处理意见