应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】求平末端的连接体系！
61/1返回列表
查看: 1734  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

shihongling

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】求平末端的连接体系！ 已有5人参与

如题，平末端连接一直连不上，是不是体系有什么要求吗？跟粘性末端连接体系有什么不同？谢谢！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-04-11 21:33:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
西瓜(金币+2): 鼓励分享经验 2011-04-12 11:06:00
引用回帖:
Originally posted by shihongling at 2011-04-11 21:33:55:
如题，平末端连接一直连不上，是不是体系有什么要求吗？跟粘性末端连接体系有什么不同？谢谢！

体系差不多的，酶稍微多加点，还有更重要的一个是连接温度更低，连接时间更长，我们用4°C/16h。
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2011-04-12 08:41:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

空谷幽风

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by shihongling at 2011-04-11 21:33:55:
如题，平末端连接一直连不上，是不是体系有什么要求吗？跟粘性末端连接体系有什么不同？谢谢！

平末端没有特殊的连接体系，可以适当的多加点连接酶和延长连接时间。如果还不行建议你同时做两份涂板的时候全涂到一块板子里。还可以换个公司的连接酶或者换感受态细胞试一下，最后一招用电转，再不行的话没辙了

[ Last edited by 空谷幽风 on 2011-4-12 at 14:03 ]
赞一下(1人) 回复此楼
a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
3楼2011-04-12 14:02:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gbrillia

银虫 (小有名气)
如果是平末端的话你的载体浓一些，20ng/ul以上，片段和载体的比在5:1，而且一些公司的连接酶平末端和粘性末端连接的体系是不同的，我们用的是fermenters，20微升体系中加入2ul的50%PEG4000，5ul连接酶。
赞一下 回复此楼
4楼2011-04-12 15:18:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuwang86
5楼2011-04-12 15:23:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

475502411

铜虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我的是粘性末端链接，最近也是连不上，不知道是什么问题，希望各位赐教
赞一下(1人) 回复此楼
可以朝九晚五，也能浪迹天涯
6楼2011-04-12 15:24:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 shihongling 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂 +7 Auroracx 2026-03-22 7/350 2026-03-22 12:38 by 素颜倾城1988
[考研] 285求调剂 +6 ytter 2026-03-22 6/300 2026-03-22 12:09 by 星空星月
[考研] 环境学硕288求调剂 +4 皮皮皮123456 2026-03-22 4/200 2026-03-22 11:07 by 杨杨杨紫
[考研] 材料求调剂 +5 @taotao 2026-03-21 5/250 2026-03-21 20:55 by lbsjt
[考研] 化学工程321分求调剂 +18 大米饭！ 2026-03-15 22/1100 2026-03-21 20:20 by HH领袖
[考研] 求调剂 +4 要好好无聊 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:57 by 学员8dgXkO
[考研] 297求调剂 +11 戏精丹丹丹 2026-03-17 12/600 2026-03-21 17:47 by ColorlessPI
[考研] 材料工程（专）一志愿985 初试335求调剂 +3 hiloiy 2026-03-17 4/200 2026-03-21 03:04 by JourneyLucky
[考研] 332求调剂 +4 ydfyh 2026-03-17 4/200 2026-03-21 02:20 by JourneyLucky
[考研] 一志愿南昌大学，327分，材料与化工085600 +9 Ncdx123456 2026-03-19 9/450 2026-03-20 23:41 by lovewei0727
[考研] 329求调剂 +9 想上学吖吖 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:01 by luoyongfeng
[考研] 材料与化工专硕调剂 +7 heming3743 2026-03-16 7/350 2026-03-20 19:31 by zhukairuo
[考研] 085410人工智能专硕317求调剂（0854都可以） +4 xbxudjdn 2026-03-18 4/200 2026-03-20 09:07 by 不168
[考研] 085601材料工程专硕求调剂 +10 慕寒mio 2026-03-16 10/500 2026-03-19 15:26 by 丁丁*
[考研] 0703化学调剂 +5 pupcoco 2026-03-17 8/400 2026-03-19 13:58 by houyaoxu
[考研] 085600材料与化工求调剂 +6 绪幸与子 2026-03-17 6/300 2026-03-19 13:27 by houyaoxu
[考研] 312求调剂 +8 陌宸希 2026-03-16 9/450 2026-03-18 12:39 by Linda Hu
[考博] 26博士申请 +3 1042136743 2026-03-17 3/150 2026-03-17 23:30 by 轻松不少随
[考研] 277调剂 +5 自由煎饼果子 2026-03-16 6/300 2026-03-17 19:26 by 李leezz
[考博] 26申博 +4 八6八68 2026-03-16 4/200 2026-03-17 13:00 by 轻松不少随
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭