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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】蛋白表达，大肠杆菌总是死。。。
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zhyzx

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】蛋白表达，大肠杆菌总是死。。。

如题，我们是按照一般的蛋白表达的方法，将含有目的基因的重组质粒转化到表达菌株BL21中，用IPTG诱导表达。最近总是出现细菌摇着摇着总是死的情况，不管是IPTG诱导前后都有发生，不知道大家有没有遇到过这种情况啊？欢迎多多交流！
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1楼 2011-04-09 13:46:51
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可蕊

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
1244479楼: Originally posted by 李艳君2011 at 2012-02-06 17:06:38
同样遇到这个情况，死掉的菌继续摇还可以摇混，也有蛋白表达，但是不太稳定，会反复死，希望各位帮忙找到原因，解决问题。

对于死后继续摇可以变浑浊，可以采取将变浑浊的菌液保存起来，然后再使用它接摇瓶，不死的话，用它划单克隆，保菌
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25楼2013-03-10 15:02:08
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)
会不会是噬菌体污染？
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2楼2011-04-09 13:59:54
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zhyzx

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 西瓜 at 2011-04-09 13:59:54:
会不会是噬菌体污染？

应该不是，因为每次并不是说每瓶都死，有的还是好好的能用的。而且整个实验室好几个人在做蛋白，每个人都出现过这种情况。
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3楼2011-04-09 14:12:41
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jhu132llh

荣誉版主 (知名作家)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+1): 鼓励 2011-04-09 18:13:48
表达的蛋白对细菌细胞本身有毒性作用
需要更温和的条件诱导以及更长的诱导时间

很难做
祝你好运
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4楼2011-04-09 15:49:13
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