【求助/交流】蛋白表达，大肠杆菌总是死。。。 - 分子生物 - 综合其他

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jhu132llh

荣誉版主 (知名作家)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
zhyzx(金币+1): 2011-04-09 17:43:52
1949stone(EPI+1): 看来只有epi了 2011-04-09 18:14:11

哦
看叙述
还有其他人也出现这种情况
并且大家的都出现有的能用有的不能用
那就不是载体的问题了
应该是细胞本身的问题了
在找找所有不能使用的瓶子度满足什么不利情况
还有不同人的不能使用的组满足什么共同情况
祝你早早找到

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6楼2011-04-09 15:57:45

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智能机器人

Robot (super robot)

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天使托

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★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
zhyzx(金币+1): 2011-04-09 17:44:00
1949stone(EPI+1): 鼓励 2011-04-09 17:59:06

1:大肠杆菌没有什么问题吧？建议看看你的宿主菌有无问题；
2：IPTG诱导浓度多大，各种文献都太一样，我们这里是0.2mM，当然了最好做一个梯度，1mM也做过。还有IPTG有没有什么问题？
3：什么培养基？按照楼主所说，摇着摇着就澄清了？一般情况下不太可能，就是营养物质再少也不会的。

其实实验上遇到什么问题，各个环节都要想到，包括培养基，枪头是否灭菌等等等等。。都要细细想想，分子这个东西就是这样子。
祝好运！

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10楼2011-04-09 17:37:28

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