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【求助/交流】蛋白表达,大肠杆菌总是死。。。
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zhyzx
金虫
(小有名气)
应助: 2
(幼儿园)
金币: 1118.4
帖子: 295
在线: 34.4小时
虫号: 697243
[交流]
【求助/交流】蛋白表达,大肠杆菌总是死。。。
如题,我们是按照一般的蛋白表达的方法,将含有目的基因的重组质粒转化到表达菌株BL21中,用IPTG诱导表达。最近总是出现细菌摇着摇着总是死的情况,不管是IPTG诱导前后都有发生,不知道大家有没有遇到过这种情况啊?欢迎多多交流!
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2011-04-09 13:46:51
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rtt0325
银虫
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小木虫(金币
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):给个红包,谢谢回帖
小丹木木(金币+1): 鼓励交流哦 2012-01-07 17:26:35
我们碰到过这个事情的,我们是噬菌体污染了,有两个方法,把死掉的菌继续摇,有抗性的能继续活下来,那个菌似乎能用的,或者就熏蒸实验室吧……
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20楼
2012-01-07 17:16:38
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西瓜
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虫号: 271749
会不会是噬菌体污染?
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2楼
2011-04-09 13:59:54
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zhyzx
金虫
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引用回帖:
Originally posted by
西瓜
at 2011-04-09 13:59:54:
会不会是噬菌体污染?
应该不是,因为每次并不是说每瓶都死,有的还是好好的能用的。而且整个实验室好几个人在做蛋白,每个人都出现过这种情况。
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3楼
2011-04-09 14:12:41
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jhu132llh
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1949stone(金币+1): 鼓励 2011-04-09 18:13:48
表达的蛋白对细菌细胞本身有毒性作用
需要更温和的条件诱导以及更长的诱导时间
很难做
祝你好运
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4楼
2011-04-09 15:49:13
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