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kerry2011

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
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虫号: 1031395

[交流] 【求助/交流】蛋白样品加热煮过和不煮，SDS-PAGE结果差异显著，这是为何？

我从一株细菌中筛选蛋白酶，发酵液测出了不错的蛋白酶活，但是发酵液超滤浓缩以后，样品加热煮过之后SDS-PAGE只在30K左右有一条带，不加热直接上样，SDS-PAGE在45-70K Da之间有多条带，这是为何？
发酵液通过55%的硫酸盐沉淀，重溶，透析，再跑SDS-PAGE，煮过的样品弥散，几乎没有主带，不煮的样品有多条带，这是为何？
请虫友们指教。

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1楼 2011-04-06 09:34:37

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小小米呐

新虫 (小有名气)

应助: 3 (幼儿园)
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帖子: 84
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虫号: 2312153

★
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引用回帖:

18楼: Originally posted by chlorella409 at 2013-04-22 17:08:22
加热肯定会破坏蛋白质的结构，如果你的样品中没有明显影响蛋白跑胶结果的东西就不用加热了，普通SDS-PAGE是变性胶，里面的SDS会破坏蛋白，你可以试试非变性胶能跑出你真正的蛋白大小

请问下，今天跑出来的胶Marker没显示出来，朋友说可以尝试胶样品加热，可以吗？