应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【求助/交流】这种情况下如何做荧光定量啊
51/1返回列表
查看: 877  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 BioEPI ，点击这里进行查看

511594234

金虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】这种情况下如何做荧光定量啊

求助，目前手上有一个基因的两个亚型，开放阅读框的序列相似性很高，设计引物做荧光定量，pcr产物测序后有非特异性扩增，无法区分开这两个亚型。想请教高手这种情况下如何做定量。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2011-03-31 21:35:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

65900931

银虫 (小有名气)
★
511594234(金币+3):谢谢参与
511594234(金币+5): 谢谢，反转录的cDNA为模板。 2011-04-01 09:24:53
看天(EPI+1): 专业指数 2011-04-01 13:49:38
不知道你是要做DNA定量还是反转录。如果是做反转录，序列同源性有多高？可以找到序列不同的地方设计PCR引物吗？
如果不行，应该可以找到一段13bp左右的序列明显差异的区域吧。设计一条引物macth这段区域，做特异引物的逆转录，然后在之前设计一对引物做real-time PCR应该就行了。
DNA的话可以考虑做探针。

[ Last edited by 65900931 on 2011-4-1 at 00:41 ]
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2011-03-31 23:27:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

六妖妖

金虫 (正式写手)
★
511594234(金币+3):谢谢参与
同源性太强还是做探针比较好分辨。
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2011-04-06 11:55:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

forrestgump

新虫 (著名写手)
★
511594234(金币+3):谢谢参与
同源性太强还是做探针比较好分辨。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-04-06 12:11:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gl185

铜虫 (正式写手)
★
511594234(金币+3):谢谢参与
好东西
回复此楼
5楼2011-04-06 12:19:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 511594234 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料学硕318求调剂 +3 February_Feb 2026-03-01 3/150 2026-03-01 22:21 by gaoxiaoniuma
[考研] 0856材料与化工，270求调剂 +5 YXCT 2026-03-01 5/250 2026-03-01 21:54 by 公瑾逍遥
[考研] 272求调剂 +6 田智友 2026-02-28 6/300 2026-03-01 21:40 by 公瑾逍遥
[考研] 292求调剂 +5 yhk_819 2026-02-28 5/250 2026-03-01 21:38 by 公瑾逍遥
[考研] 一志愿郑大材料学硕298分，求调剂 +3 wsl111 2026-03-01 3/150 2026-03-01 21:38 by ms629
[考研] 274求调剂 +3 cgyzqwn 2026-03-01 6/300 2026-03-01 21:24 by cgyzqwn
[考研] 0805总分292，求调剂 +7 幻想之殇 2026-03-01 7/350 2026-03-01 21:22 by 公瑾逍遥
[考研] 299求调剂 +3 Y墨明棋妙Y 2026-02-28 5/250 2026-03-01 21:01 by tangxiaotian
[考研] 化工299分求调剂 一志愿985落榜 +5 嘻嘻(*^ω^*) 2026-03-01 5/250 2026-03-01 19:47 by 无际的草原
[考研] 298求调剂 +6 axyz3 2026-02-28 6/300 2026-03-01 19:00 by 18137688336
[考研] 328求调剂 +3 aaadim 2026-03-01 5/250 2026-03-01 17:29 by njzyff
[考研] 285求调剂 +8 满头大汗的学生 2026-02-28 8/400 2026-03-01 16:47 by caszguilin
[考研] 311求调剂 +6 亭亭亭01 2026-03-01 6/300 2026-03-01 15:41 by 324616
[考研] 295复试调剂 +3 简木ChuFront 2026-03-01 3/150 2026-03-01 14:27 by zzxw520th
[考研] 302材料工程求调剂 +4 Doleres 2026-03-01 5/250 2026-03-01 11:52 by liqiongjy
[考研] 调剂 +3 简木ChuFront 2026-02-28 3/150 2026-03-01 11:46 by 王伟要上岸啊
[硕博家园] 2025届双非化工硕士毕业，申博 +3 更多的是 2026-02-27 4/200 2026-03-01 10:04 by ztg729
[论文投稿] Optics letters投稿被拒求助 30+3 luckyry 2026-02-26 4/200 2026-03-01 09:06 by babero
[考研] 276求调剂 +3 路lyh123 2026-02-28 4/200 2026-02-28 19:45 by 路lyh123
[高分子] 求环氧树脂研发1名 +3 孙xc 2026-02-25 11/550 2026-02-28 16:57 by ichall
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭