24小时热门版块排行榜    

查看: 1916  |  回复: 16

a83875785

铁杆木虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】western实验时加一抗的问题 已有10人参与

本人是新手,最近在学western blot,我要检测sirt1,p53,caspase,贝塔-actin,等好几个蛋白,那么我加一抗的时候能不能同时加入Anti-sirt1,Anti-p53,Anti-caspase,贝塔-actin等这些一抗呢?然后一起洗去一抗,一起再加上述一抗的二抗呢?
为什么我见实验室其他人都分开做,比如今天只检测Sirt1的,明天再检测贝塔-actin的,这样不是很浪费时间么?confused,求解。

[ Last edited by a83875785 on 2011-3-29 at 20:41 ]
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1): 感谢交流 2011-03-29 22:53:22
抗体之间要是有交叉反应就不行了…………
2楼2011-03-29 22:15:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

a83875785

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2011-03-29 22:15:19:
抗体之间要是有交叉反应就不行了…………

那如果没有交叉的话,可以一起加ma?
3楼2011-03-31 09:32:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by a83875785 at 2011-03-31 09:32:27:
那如果没有交叉的话,可以一起加ma?

可以
然而,万一下次你不需要这么多蛋白同时检测,那岂不是浪费了这管稀释液?
4楼2011-03-31 09:36:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

其实分子量相差很远,就可以把膜剪开做
5楼2011-03-31 09:37:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

a83875785

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2011-03-31 09:37:14:
其实分子量相差很远,就可以把膜剪开做

其实分子量相差很远,就可以把膜剪开做

_________这句话是啥意思?不懂
6楼2011-03-31 09:38:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

张力民1598

铜虫 (小有名气)

你可以同时跑几块胶啊
7楼2011-03-31 09:44:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

a83875785

铁杆木虫 (著名写手)

内容已删除
8楼2011-03-31 10:09:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by a83875785 at 2011-03-31 09:38:47:
其实分子量相差很远,就可以把膜剪开做

_________这句话是啥意思?不懂

转膜后根据分子量剪开成几块,同时分别孵抗体
9楼2011-03-31 10:24:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
除非你的抗原抗体很特意,两分子量查的比较远,并且丰度类似,曝光出现很完美的两条带

否则抗体稀释比例不好确定,曝光程度更是不好把握,很容易失去定量功能

条件摸的很好的内参可以带上一试
10楼2011-03-31 12:46:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 a83875785 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +14 ziyangfang 2026-08-19 17/850 2026-08-24 18:37 by 哈哈蛤?
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +20 koalala 2026-08-24 22/1100 2026-08-24 18:01 by Nano-Firefly
[基金申请] 人气不行了 +9 fansofjerry 2026-08-21 9/450 2026-08-24 17:48 by zhaozhengxin
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +6 图啦图啦 2026-08-24 6/300 2026-08-24 17:44 by 小小红帆
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑,不妨来听听这首《基金之外》 +5 scalable 2026-08-24 5/250 2026-08-24 17:03 by spiderzhuzhi
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +17 医学老男孩 2026-08-20 21/1050 2026-08-24 14:21 by refreshing11
[基金申请] 我面上完蛋了 +8 且听虎啸 2026-08-20 9/450 2026-08-24 13:52 by zzuzxg
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +6 炎黄贵胄 2026-08-22 7/350 2026-08-24 11:58 by 6543yes
[基金申请] 朋友圈看到的 +7 wangzilk 2026-08-18 9/450 2026-08-24 10:50 by cmrandy
[基金申请] 放榜前的不淡定 20+4 snowwithsea 2026-08-19 17/850 2026-08-24 10:20 by echo8914667
[基金申请] 明天应该可查了!? +4 chengyan1220 2026-08-23 4/200 2026-08-24 08:47 by gloomy6159
[基金申请] 什么时候开奖? +10 CrisMessi 2026-08-18 11/550 2026-08-24 06:50 by 开心的小狮子
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +24 yaoyewhu2008 2026-08-20 26/1300 2026-08-22 17:43 by kammury
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
信息提示
请填处理意见