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laoyisng1122

铁虫 (正式写手)

[交流] 【求助】样品出峰时间大概在30多分钟。但是基线漂移很严重? 已有7人参与

在用HPLC-UV分析 isospinosin,,, spinosin  。首先,这两个化合物是7位和8位的取代基位置互换,其他都一样。在甲醇-水流动相中能分离开,洗脱梯度为70%aq-0;时间为 0-60min,出峰时间大概在30多分钟。但是基线漂移很严重。换乙腈-水后,怎么也分不开。怎么办???
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laoyisng1122

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by xiaodu2007693 at 2011-03-28 12:11:07:
洗脱梯度为70%aq-0;时间为 0-60min?
你从水一直到70%,60分钟跑完是吗?
如果是的话,别从水开始,20%也行啊,梯度变得慢一点

首先很感谢朋友的积极建议。 由于我的样品至少需要检测5个峰以上,所以,检测范围比较宽。用70%水:30甲醇-0%水:100%甲醇,时间:0-60min。大概10min左右出的第一个峰是需要的,然后20min左右是第二个峰。接着就是30min多分钟出现好多峰,有很严重重叠,其中isospinosin ,spinosin就是在这里,但是分开了。然后50多分钟出现的jujubosideA也是需要的。所以,样品中需要测的化合物极性好像差别比较大。 基线漂移,我估计是因为梯度比较陡。所以换成乙腈和水系统。 为了摸索isospinosin ,spinosin 分离的条件,就这两个化合物进样,梯度范围为25%乙腈-50%乙腈,0-30min, 出峰 时间24min左右,分离度0.5, 不能完全分离, 于是降低乙腈浓度,为20%乙腈-50%乙腈,时间不变,结果分离度差不多。出峰时间延长接近30min.
8楼2011-04-01 19:54:56
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hyyyzyq

银虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
dream意(金币+1): 2011-03-28 10:44:38
1.基线漂移严重的原因可能是进样之前流动相没有平衡好,也有可能是梯度洗脱过程中压力不稳定导致的基线漂移
2.你的乙腈和水的比例是多少呢
2楼2011-03-28 09:59:26
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luojin7653

银虫 (正式写手)

基线漂移可以解决的..多平衡一下吧...
今晚打老虎
3楼2011-03-28 10:23:23
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xiaodu2007693

木虫 (著名写手)

药学版~龙猫

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
jiangchunyong(金币+1): 谢谢! 2011-03-28 13:21:48
洗脱梯度为70%aq-0;时间为 0-60min?
你从水一直到70%,60分钟跑完是吗?
如果是的话,别从水开始,20%也行啊,梯度变得慢一点
欢迎您来药学版~
4楼2011-03-28 12:11:07
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