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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 中药学 » 【求助】用三氯醋酸处理样品后，基线漂移，着急~~
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木樨mx

银虫 (正式写手)

[交流] 【求助】用三氯醋酸处理样品后，基线漂移，着急~~ 已有3人参与

请教各位老师：
       血液样品用三氯醋酸沉淀蛋白，进样后基线漂的特别厉害。
       分析物为生物碱，反相c18，检测波长为210nm，流动相乙腈：0.1%磷酸（三乙胺调oh3.5）5:95，等度洗脱。

       是不是跟三氯醋酸处理方法有关？采用1%，10%分别处理样品，都存在这个问题，是不是处理后的样品ph太低，柱子承受不了？

       之前采用别的前处理方法如液液萃取时并没有漂移的现象。
       是不是跟检测波长低有关？因为样品要批量处理，进一个样平衡一次貌似也不是很现实，特求助于各位老师，望不吝指教。

       多谢~~





[ Last edited by 木樨mx on 2010-5-15 at 16:51 ]
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1楼 2010-05-15 15:48:35
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冷冰雨

银虫 (小有名气)
木樨mx(金币+1):呵呵，谢谢帮顶，能给点意见更好~ 2010-05-15 16:09:54
顶顶
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2楼2010-05-15 16:05:57
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xuwen78

禁虫 (小有名气)
★
westzilch(金币+1):谢谢交流！ 2010-05-16 18:58:34
木樨mx(金币+5):谢谢 2010-05-17 21:49:55
本帖内容被屏蔽
3楼2010-05-16 11:26:03
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木樨mx

银虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by xuwen78 at 2010-05-16 11:26:03:
楼主用的色谱柱的柱长和流速是多少？210nm的波长下血浆样品中很多杂质都会出峰，而且沉淀蛋白的样品很脏，所以一般前5min左右出很多杂质峰是正常的，但是楼主的色谱峰有点怪，楼主可以试一下把样品加点碱中和一下 ...

柱长25cm的，流速是1ml/min  
应该是三氯醋酸的问题，就算我用进一针平衡一次的方法基线仍然漂移，当然比传上的图堪入目多了，可能就是因为三氯醋酸在低波长下噪音太厉害了吧，加碱中和了之后也没太大改善，应该是得放弃这种处理方法了吧。
不过，很谢谢~~
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4楼2010-05-17 21:49:35
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