应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】做过RT-PCR的请进
51/1返回列表
查看: 2244  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

houhoujiayou

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】做过RT-PCR的请进

大家好，我因为新近才换课题，要提mRNA做反转录，因为实验室没有人做过，不知道试验中应该注意什么，还有都要用到什么试剂盒什么酶？请做过的人降一下我也好让老师早点买试剂盒和酶啊，先谢谢了啊。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2011-03-14 09:01:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

没有眼泪

铜虫 (初入文坛)
houhoujiayou(金币+1): 2011-03-16 12:01:28
1.提取总RNA，跑胶看一下质量
2.RT-PCR，一般用Olig-dT转录出cDNA（我们用的是东洋舫的盒子）
再进行后续实验
赞一下 回复此楼
9楼2011-03-14 14:39:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

nininini

银虫 (小有名气)
★ ★
houhoujiayou(金币+5): 谢谢MM了，但是不是很明白，要DNase消化是为什么啊？另外为什么说“只做反转录”啊，还有其他的操作目的吗？我是要把酵母的基因反P出来后做表达的啊，MM做过的话可以说的详细点吗？谢谢了啊 2011-03-14 09:16:09
lstt09nk(金币+2): 鼓励交流 2011-03-14 09:26:11
如果是只做反转录的话只需要提取RNA、DNase消化和反转录酶了，根据实验室情况RNA提取可以用试剂盒也可以用其它试剂提取，DNase和反转录酶也都差不多了，找平时经常使用试剂的厂家应该问题不大了吧，天根、生工什么的应该都没问题吧
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-03-14 09:08:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

weishengsu5

木虫 (正式写手)
houhoujiayou(金币+3): 这个我听说过了，说要用什么溶液把所有要用的仪器泡一下，那基本上要买什么试剂盒和酶啊，能把操作步骤详细讲一下嘛？虽然看过理论，可是实际做起来还是无从下手，咳 2011-03-14 09:25:30
引用回帖:
Originally posted by houhoujiayou at 2011-03-14 09:01:37:
大家好，我因为新近才换课题，要提mRNA做反转录，因为实验室没有人做过，不知道试验中应该注意什么，还有都要用到什么试剂盒什么酶？请做过的人降一下我也好让老师早点买试剂盒和酶啊，先谢谢了啊。

在提取mRNA中注意他是很容易降解的，自然环境中都存在着核酸酶，所以提取过程中注意下
赞一下 回复此楼
3楼2011-03-14 09:17:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

weishengsu5

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by nininini at 2011-03-14 09:08:21:
如果是只做反转录的话只需要提取RNA、DNase消化和反转录酶了，根据实验室情况RNA提取可以用试剂盒也可以用其它试剂提取，DNase和反转录酶也都差不多了，找平时经常使用试剂的厂家应该问题不大了吧，天根、生工什么 ...

你是研究什么代谢的，我们课题组也是代谢方向的
赞一下 回复此楼
4楼2011-03-14 09:22:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 311求调剂 +10 冬十三 2026-03-15 11/550 2026-03-18 09:04 by zhukairuo
[考研] 281求调剂（0805） +3 烟汐忆海 2026-03-16 9/450 2026-03-18 07:23 by 烟汐忆海
[考研] 一志愿天津大学化学工艺专业（081702）315分求调剂 +7 yangfz 2026-03-17 7/350 2026-03-17 23:57 by 星空星月
[考研] 085601材料工程专硕求调剂 +5 慕寒mio 2026-03-16 5/250 2026-03-17 21:31 by hmn_wj
[考研] 能源材料化学课题组招收硕士研究生8-10名 +3 脱颖而出 2026-03-16 6/300 2026-03-17 21:19 by z1z2z3879
[考研] 296求调剂 +5 大口吃饭 身体健 2026-03-13 5/250 2026-03-17 21:05 by 不惑可乐
[考研] 326求调剂 +5 上岸的小葡 2026-03-15 6/300 2026-03-17 17:26 by ruiyingmiao
[考研] 考研调剂 +3 淇ya_~ 2026-03-17 5/250 2026-03-17 09:25 by Winj1e
[考研] [导师推荐]西南科技大学国防/材料导师推荐 +3 尖角小荷 2026-03-16 6/300 2026-03-16 23:21 by 尖角小荷
[考研] 286求调剂 +3 lemonzzn 2026-03-16 5/250 2026-03-16 20:43 by lemonzzn
[考研] 283求调剂 +10 小楼。 2026-03-12 14/700 2026-03-16 16:08 by 13811244083
[考研] 085600材料与化工 求调剂 +13 enenenhui 2026-03-13 14/700 2026-03-16 15:19 by 了了了了。。
[考研] 285求调剂 +6 ytter 2026-03-12 6/300 2026-03-16 15:05 by njzyff
[考研] 277材料科学与工程080500求调剂 +3 自由煎饼果子 2026-03-16 3/150 2026-03-16 14:10 by 运气yunqi
[考研] 297一志愿上交085600求调剂 +5 指尖八千里 2026-03-14 5/250 2026-03-14 17:26 by a不易
[考研] 学硕285求调剂 +13 Wisjxn 2026-03-12 46/2300 2026-03-14 10:33 by JourneyLucky
[考研] 304求调剂 +7 7712b 2026-03-13 7/350 2026-03-13 21:42 by peike
[考研] 四川大学085601材料工程专硕 初试294求调剂 +4 祝我们好在冬天 2026-03-11 4/200 2026-03-13 21:39 by peike
[考研] 考研调剂 +4 芬达46 2026-03-12 4/200 2026-03-13 16:04 by ruiyingmiao
[考研] 材料专硕350 求调剂 +4 王金科 2026-03-12 4/200 2026-03-13 16:02 by ruiyingmiao
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭