24小时热门版块排行榜    

查看: 2892  |  回复: 12
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

houhoujiayou

银虫 (小有名气)


[交流] 【求助/交流】做过RT-PCR的请进

大家好,我因为新近才换课题,要提mRNA做反转录,因为实验室没有人做过,不知道试验中应该注意什么,还有都要用到什么试剂盒什么酶?请做过的人降一下我也好让老师早点买试剂盒和酶啊,先谢谢了啊。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nininini

银虫 (小有名气)


houhoujiayou(金币+1): 谢谢 2011-03-22 20:57:24
引用回帖:
Originally posted by nininini at 2011-03-14 09:08:21:
如果是只做反转录的话只需要提取RNA、DNase消化和反转录酶了,根据实验室情况RNA提取可以用试剂盒也可以用其它试剂提取,DNase和反转录酶也都差不多了,找平时经常使用试剂的厂家应该问题不大了吧,天根、生工什么 ...

DNase的目的是进一步消化未完全除尽的DNA,如果只是表达的话不用定量之类的相对要求低一点儿,只要能P出产物就好了~
12楼2011-03-15 17:31:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

nininini

银虫 (小有名气)


★ ★
houhoujiayou(金币+5): 谢谢MM了,但是不是很明白,要DNase消化是为什么啊?另外为什么说“只做反转录”啊,还有其他的操作目的吗?我是要把酵母的基因反P出来后做表达的啊,MM做过的话可以说的详细点吗?谢谢了啊 2011-03-14 09:16:09
lstt09nk(金币+2): 鼓励交流 2011-03-14 09:26:11
如果是只做反转录的话只需要提取RNA、DNase消化和反转录酶了,根据实验室情况RNA提取可以用试剂盒也可以用其它试剂提取,DNase和反转录酶也都差不多了,找平时经常使用试剂的厂家应该问题不大了吧,天根、生工什么的应该都没问题吧
2楼2011-03-14 09:08:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

weishengsu5

木虫 (正式写手)


houhoujiayou(金币+3): 这个我听说过了,说要用什么溶液把所有要用的仪器泡一下,那基本上要买什么试剂盒和酶啊,能把操作步骤详细讲一下嘛?虽然看过理论,可是实际做起来还是无从下手,咳 2011-03-14 09:25:30
引用回帖:
Originally posted by houhoujiayou at 2011-03-14 09:01:37:
大家好,我因为新近才换课题,要提mRNA做反转录,因为实验室没有人做过,不知道试验中应该注意什么,还有都要用到什么试剂盒什么酶?请做过的人降一下我也好让老师早点买试剂盒和酶啊,先谢谢了啊。

在提取mRNA中注意他是很容易降解的,自然环境中都存在着核酸酶,所以提取过程中注意下
3楼2011-03-14 09:17:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

weishengsu5

木虫 (正式写手)


引用回帖:
Originally posted by nininini at 2011-03-14 09:08:21:
如果是只做反转录的话只需要提取RNA、DNase消化和反转录酶了,根据实验室情况RNA提取可以用试剂盒也可以用其它试剂提取,DNase和反转录酶也都差不多了,找平时经常使用试剂的厂家应该问题不大了吧,天根、生工什么 ...

你是研究什么代谢的,我们课题组也是代谢方向的
4楼2011-03-14 09:22:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 TZqyNTBa07NP 2026-11-13 3/150 2026-11-15 11:47 by xSrQNSSjcgoX
[考博] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 XJXMuRjD7cK7 2026-11-13 3/150 2026-11-15 07:23 by xSrQNSSjcgoX
[硕博家园] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 XJXMuRjD7cK7 2026-11-13 4/200 2026-11-15 06:50 by xSrQNSSjcgoX
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 uKOSCocCb6Fm 2026-11-13 3/150 2026-11-15 05:11 by xSrQNSSjcgoX
[基金申请] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 uKOSCocCb6Fm 2026-11-13 3/150 2026-11-15 04:16 by xSrQNSSjcgoX
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 uKOSCocCb6Fm 2026-11-12 5/250 2026-11-15 03:21 by xSrQNSSjcgoX
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 uKOSCocCb6Fm 2026-11-12 8/400 2026-11-15 02:26 by xSrQNSSjcgoX
[硕博家园] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +7 0TEMgxdT1eIw 2026-11-09 10/500 2026-11-15 00:39 by Equinoxhua
[考研] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +8 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 9/450 2026-11-13 11:11 by Equinoxhua
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-10 4/200 2026-11-12 11:22 by HajghKOMynmz
[基金申请] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 czAiolzR0IJC 2026-11-10 9/450 2026-11-12 11:11 by HajghKOMynmz
[教师之家] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 czAiolzR0IJC 2026-11-10 7/350 2026-11-12 11:00 by HajghKOMynmz
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 G2rhSvqvhNzl 2026-11-10 6/300 2026-11-12 10:38 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 C6CRn66RYYXS 2026-11-10 7/350 2026-11-12 10:16 by HajghKOMynmz
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 C6CRn66RYYXS 2026-11-10 8/400 2026-11-12 10:16 by HajghKOMynmz
[硕博家园] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +8 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 12/600 2026-11-12 09:32 by HajghKOMynmz
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 cdqGD6ftHmbl 2026-11-11 3/150 2026-11-12 07:53 by HajghKOMynmz
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-10 6/300 2026-11-12 07:09 by 9fOTqj074tIg
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 czAiolzR0IJC 2026-11-10 5/250 2026-11-12 06:36 by 9fOTqj074tIg
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 czAiolzR0IJC 2026-11-10 5/250 2026-11-12 06:25 by 9fOTqj074tIg
信息提示
请填处理意见