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dreamshaker

铜虫 (正式写手)


[交流] 【求助/交流】看一下我做的蛋白质是不是变性了

我做的是从提取动物肝脏中的细胞色素c,在最后一步三氯乙酸处理离心后有白色沉

淀,除去了部分的清液,大概有三分之二,因为要做透析,透析袋容量有限就没有加

去离子水,透析过夜后发现有些浑浊的白絮状不均匀存在,不知道是不是已经变性

了,老师说三氯乙酸的变性沉淀是可逆的,有好些同学做的是深红色沉淀极少,我的

浅红色,是不是也可能存在浓度太大析出的可能呢?

我测了520nm,吸光度比其他组做的要大很多,蛋白质变性以后是不是在比较宽的区

间内比如100nm的跨度吸光度的增长都会很明显啊,还是只在原有的最强吸光度上有

所增加呢?

[ Last edited by dreamshaker on 2011-3-14 at 20:27 ]
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dreamshaker

铜虫 (正式写手)


引用回帖:
Originally posted by zhengfan1109 at 2011-03-13 00:28:37:
你可以测定离心之后和不离心的蛋白活性,实验结果出来才知道活性还存在没有。

离心之前用三氯乙酸处理了,是浑浊但比较均一的状态,离心之后是白色沉淀,老师说这是纯度高的体现,但越往后做我越是怀疑了
8楼2011-03-14 20:59:34
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dreamshaker

铜虫 (正式写手)


我晕,这个问题很难吗?

引用回帖:
Originally posted by dreamshaker at 2011-03-12 23:07:36:
谢谢了

真的很难吗?
3楼2011-03-12 23:24:50
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zhengfan1109

银虫 (正式写手)


dreamshaker(金币+2): 2011-03-14 20:23:05
dreamshaker(金币+2): 2011-03-14 20:58:39
你可以测定离心之后和不离心的蛋白活性,实验结果出来才知道活性还存在没有。
4楼2011-03-13 00:28:37
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wqj1988926

金虫 (正式写手)


dreamshaker(金币+2): 2011-03-14 20:22:47
dreamshaker(金币+2): 2011-03-14 21:00:58
是不是浓度太大导致蛋白析出,还有楼主的储存条件最好说明一下,给大家参考下
5楼2011-03-13 09:41:51
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