应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】我的PCR引物很好，但加酶切位点后扩不出来，不知道什么原因？
171/1返回列表
查看: 2887  |  回复: 16
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

475502411

铜虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】我的PCR引物很好，但加酶切位点后扩不出来，不知道什么原因？

我的PCR引物很好，但加酶切位点后扩不出来，不知道什么原因？请高手指点！！！谢谢
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2011-03-10 23:04:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)
★ ★ ★
475502411(金币+1):谢谢参与
最爱花诗雨(金币+2): 鼓励交流~ 2011-03-11 09:47:05
引用回帖:
Originally posted by 475502411 at 2011-03-10 23:04:08:
我的PCR引物很好，但加酶切位点后扩不出来，不知道什么原因？请高手指点！！！谢谢

看看你加酶切位点之后有没有和3‘端配对儿，形成发卡？

PCR之后有没有引物二聚体？
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2011-03-10 23:11:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

anjinghebust

至尊木虫 (知名作家)
★
475502411(金币+1):谢谢参与
祝福难题早日解决！
回复此楼
4楼2011-03-10 23:42:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

phoenix211

金虫 (小有名气)
★
475502411(金币+1):谢谢参与
可以优化下扩增的条件。
做个温度梯度。
调整下体系什么的。
加点BSA或DMSO什么的有时候会有效果。
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2011-03-11 01:33:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangxn2010

木虫 (著名写手)
★
475502411(金币+1):谢谢参与
引物设计问题
回复此楼
6楼2011-03-11 08:07:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)
★
475502411(金币+1):谢谢参与
加了酶切位点后就不是你那个 很好的引物了。。。
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2011-03-11 09:01:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yeruoshui

银虫 (正式写手)
★
475502411(金币+1):谢谢参与
我的也是，P出来的都是二聚体
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2011-03-11 09:26:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (小有名气)
★
475502411(金币+1):谢谢参与
本帖仅楼主可见
赞一下
11楼2011-03-11 09:36:37
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

lordring

金虫 (著名写手)
★
475502411(金币+1):谢谢参与
不懂，帮顶，祝福楼主早日解决问题。
赞一下(1人) 回复此楼
12楼2011-03-11 09:42:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天使托

专家顾问 (职业作家)
★
475502411(金币+1):谢谢参与
最好是设计好你的引物之后，加上酶切位点和保护碱基再用软件看看引物可用否？
赞一下(1人) 回复此楼
13楼2011-03-11 09:54:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

过氧化氢

铁虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★
475502411(金币+1):谢谢参与
dhd997(金币+3): 很活跃，鼓励 2011-03-24 16:35:07
可能形成二聚体了
赞一下(2人) 回复此楼
14楼2011-03-24 14:34:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sxq大嘴

铁虫 (初入文坛)
★ ★
475502411(金币+1):谢谢参与
dhd997(金币+1): 鼓励交流 2011-03-28 11:41:53
你把加好酶切位点的引物，用软件分析一下，引物之间的及引物与序列之间的
赞一下(2人) 回复此楼
15楼2011-03-28 11:15:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

csdyg

木虫 (正式写手)
★
475502411(金币+1):谢谢参与
估计酶切位点与3‘端形成发卡结构
赞一下(1人) 回复此楼
16楼2011-03-28 16:32:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

麻花13

新虫 (小有名气)
★
475502411(金币+1): 谢谢参与
建议在使用引物设计软件使，把酶切位点及保护碱基序列加到原来模板的末端，然后再设计
赞一下(1人) 回复此楼
17楼2012-04-07 07:44:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
abczhang3楼
2011-03-10 23:18   回复  
475502411(金币+1):谢谢参与
huashixin8楼
2011-03-11 09:14   回复  
475502411(金币+1):谢谢参与
顶一下
jiangxue8210楼
2011-03-11 09:33   回复  
475502411(金币+1):谢谢参与
相关版块跳转 我要订阅楼主 475502411 的主题更新
171/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 科研孤儿太难了 +15 我4大白菜 2026-08-20 16/800 2026-08-21 11:07 by yming1319
[基金申请] 我面上完蛋了 +6 且听虎啸 2026-08-20 6/300 2026-08-21 10:59 by Vivilian
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧？ +4 哈哈蛤？ 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 让我中一个面上吧！ +10 大萍1987 2026-08-20 12/600 2026-08-21 09:31 by 020100099
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 13/650 2026-08-21 08:30 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 时间戳今天，20号变了 +4 archvillain 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:10 by gatelove
[基金申请] 时间戳又变了 +12 wuchongjun 2026-08-20 17/850 2026-08-20 20:05 by spzhao
[基金申请] 今天系统多次维护，明天很可能放榜！ +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
[基金申请] 重要消息，中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] filecode，4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 13/650 2026-08-19 21:28 by aasahr
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低？主要原因有哪些？ +5 瞬息宇宙 2026-08-15 5/250 2026-08-19 20:23 by super2002521
[基金申请] 今天放榜吗？ +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] 快农历七夕节了，轻松一下，男人悄悄话，女施主请不要进来。 +6 Tide man 2026-08-14 7/350 2026-08-19 09:56 by ZJTJZ
[基金申请] 什么时候开奖？ +6 CrisMessi 2026-08-18 6/300 2026-08-19 08:06 by Equinoxhua
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +14 archvillain 2026-08-15 26/1300 2026-08-18 13:37 by phantomgost
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
[精细化工] 招聘 金属平磨液，抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 各位道友，我要去昆明玩几天，回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭