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【求助/交流】我的PCR引物很好,但加酶切位点后扩不出来,不知道什么原因?
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475502411
铜虫
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虫号: 933070
[交流]
【求助/交流】我的PCR引物很好,但加酶切位点后扩不出来,不知道什么原因?
我的PCR引物很好,但加酶切位点后扩不出来,不知道什么原因?请高手指点!!!谢谢
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2011-03-10 23:04:08
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gongeleven
铁杆木虫
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★
475502411(金币
+1
):谢谢参与
加了酶切位点后就不是你那个 很好的引物了。。。
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7楼
2011-03-11 09:01:55
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brightfuture01
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★ ★ ★
475502411(金币
+1
):谢谢参与
最爱花诗雨(金币+2): 鼓励交流~ 2011-03-11 09:47:05
引用回帖:
Originally posted by
475502411
at 2011-03-10 23:04:08:
我的PCR引物很好,但加酶切位点后扩不出来,不知道什么原因?请高手指点!!!谢谢
看看你加酶切位点之后有没有和3‘端配对儿,形成发卡?
PCR之后有没有引物二聚体?
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2楼
2011-03-10 23:11:10
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anjinghebust
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★
475502411(金币
+1
):谢谢参与
祝福难题早日解决!
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4楼
2011-03-10 23:42:38
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phoenix211
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★
475502411(金币
+1
):谢谢参与
可以优化下扩增的条件。
做个温度梯度。
调整下体系什么的。
加点BSA或DMSO什么的有时候会有效果。
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5楼
2011-03-11 01:33:10
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