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wqf@126.com

银虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】蛋白质的阴离子交换纯化 已有12人参与

各位大侠:
      
        我做的蛋白等电点是4.3,用PH=7.4的PBS缓冲液作为A液来平衡柱子,该缓冲液不含NaCl,结果出乎意料的是我的蛋白质竟然不能结合到柱子上去,而直接从柱子里穿透出来,这是为什么呢?
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cjl2fl

金虫 (正式写手)

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rainwander(金币+2): 鼓励新虫 2011-03-07 19:54:16
可能是柱子的问题吧,影响蛋白质吸附的因素很多的。离子强度较显著,其次pH,温度。。。。
是不是你配的缓冲有问题?比如缓冲种类,浓度。。。
可以适当控制一下温度,缓冲预先冷一下
8楼2011-03-07 17:03:49
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微笑漩涡

新虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你的蛋白对NaCl敏感么? 离子强度不够,蛋白挂不上去吧?
2楼2011-03-07 15:52:10
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wqf@126.com

银虫 (正式写手)

应该不是因为这个原因,在做离子交换之前我加热处理了我的蛋白,不知道加热对它会不会有影响?
3楼2011-03-07 16:13:53
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lcy1971

银虫 (小有名气)

★ ★ ★
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rainwander(金币+2): 鼓励新虫 2011-03-07 19:54:02
离子交换低盐上样,没有氯化钠不影响。
是不是柱子有问题?也许介质没处理好。找个阳性对照吧。
4楼2011-03-07 16:38:05
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