| 查看: 2387 | 回复: 13 | ||||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||||
wqf@126.com银虫 (正式写手)
|
[交流]
【求助/交流】蛋白质的阴离子交换纯化 已有12人参与
|
|||
|
各位大侠： 我做的蛋白等电点是4.3，用PH=7.4的PBS缓冲液作为A液来平衡柱子，该缓冲液不含NaCl，结果出乎意料的是我的蛋白质竟然不能结合到柱子上去，而直接从柱子里穿透出来，这是为什么呢？ |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有210人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 蛋白纯化遇到问题
已经有22人回复
- 酶的纯化问题
已经有8人回复
- 离子交换层析（deae-纤维素）出峰差异很大（有图谱）
已经有26人回复
- 蛋白质固定吸附与蛋白质分离纯化的区别
已经有9人回复
- 羧甲基纤维素和DEAE纤维素分离蛋白有什么区别？
已经有4人回复
- 使用DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换层析纯化蛋白后杂蛋白的洗脱
已经有7人回复
- 蛋白纯化分离问题
已经有19人回复
wqf@126.com
银虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 14.6
- 散金: 11
- 红花: 1
- 帖子: 380
- 在线: 501小时
- 虫号: 1099878
- 注册: 2010-09-15
- 性别: GG
- 专业: 波谱分析与成像分析
3楼2011-03-07 16:13:53
微笑漩涡
新虫 (著名写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 6.6
- 散金: 232
- 帖子: 1003
- 在线: 87.3小时
- 虫号: 577221
- 注册: 2008-06-22
- 专业: 生物大分子结构与功能
你的蛋白对NaCl敏感么？ 离子强度不够，蛋白挂不上去吧？ 2楼2011-03-07 15:52:10
4楼2011-03-07 16:38:05
冼亮淀粉酶
专家顾问 (知名作家)
生物大分子降解酶
-
专家经验: +248 - MolEPI: 46
- 应助: 257 (大学生)
- 贵宾: 0.272
- 金币: 19455.4
- 散金: 1704
- 红花: 121
- 帖子: 6586
- 在线: 2777.2小时
- 虫号: 856414
- 注册: 2009-09-25
- 性别: GG
- 专业: 环境微生物学
- 管辖: 微生物
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+2): 鼓励积极参与交流~~~ 2011-03-07 19:53:43
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+2): 鼓励积极参与交流~~~ 2011-03-07 19:53:43
|
加热是否对目标蛋白质有影响，怎么上柱前不测定？最好每一步都有蛋白质总量和目标蛋白质总量和活性的数据，不然出了问题也不知道在哪里出，或者出了问题还不能及时发现。 阴离子交换层析需要低盐吸附，高盐洗脱，所以平衡液和蛋白质样品的离子浓度都不能高。你的目标蛋白质等电点在4.3，平衡液的pH值为7.4，产生的电荷差距足够吸附有余了，所以不能吸附的原因是蛋白质早就失去活性，怎么测都测不到，或者平衡液和蛋白质样品离子浓度过高，样品没能被吸附就被洗脱。注意过电导率cond%吗？ 无图无真相，如果是用AKTA的，把图截下来发上来。如果是用自动收集仪的，就尽量获得离子强度的测定方法，弄个电导仪。 |
5楼2011-03-07 16:41:24
