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tongxinkxy

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】原核表达,预测的信号肽序列是否包括 已有7人参与

看有的文献,在设计引物时,要把信号肽的区域去掉,然后连入载体表达
请问这是必须的吗
如果这个信号肽序列是用软件预测的,也可以相信吗?
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

★ ★
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rainwander(金币+1): 鼓励积极参与交流~~~ 2011-02-25 18:07:30
信号肽跟成熟蛋白活性没有关系的,如果异源表达一定要除去的,不然宿主菌不会把信号肽切割的,最后表达的蛋白比成熟蛋白多了一段氨基酸。
用几个不同软件预测下,结果基本可信的。
2楼2011-02-25 17:44:19
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sutao1979

木虫 (著名写手)

小木虫10年groupleader

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by lxj341401 at 2011-02-25 17:44:19:
信号肽跟成熟蛋白活性没有关系的,如果异源表达一定要除去的,不然宿主菌不会把信号肽切割的,最后表达的蛋白比成熟蛋白多了一段氨基酸。
用几个不同软件预测下,结果基本可信的。

exactly,signal peptide should be cut in exotic protein expression
会当凌绝顶,一览众山小
3楼2011-02-25 18:26:14
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tongxinkxy

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by sutao1979 at 2011-02-25 18:26:14:
exactly,signal peptide should be cut in exotic protein expression

请问您的意思是,需不需要去掉信号肽序列,设计引物呢?
4楼2011-03-02 13:59:27
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spiderboy

金虫 (正式写手)

★
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引用回帖:
Originally posted by tongxinkxy at 2011-03-02 13:59:27:
请问您的意思是,需不需要去掉信号肽序列,设计引物呢?

当然要去掉信号肽序列设计引物了。。。从去掉后的第一个氨基酸开始设计
5楼2011-03-02 19:10:37
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xhjggl

木虫 (正式写手)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
异源表达时是需要去除信号肽序列的
6楼2011-03-02 21:33:12
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1985228

铁虫 (小有名气)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
那去除信号肽后,需要再加上ATG起始密码子么?
7楼2011-03-30 13:40:27
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libin913

新虫 (初入文坛)

【求助/交流】原核表达,预测的信号肽序列是否包括

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
通常在异源表达时,蛋白上的信号肽是需要去掉的,扩增基因的时候需要从成熟蛋白的第一个氨基酸开始,在整个读码框中需要有ATG。
8楼2011-03-31 10:20:46
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