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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】DGGE的问题
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gemmy冷心

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】DGGE的问题

我做DGGE的时候，制胶之后点样孔里总是剩下一点液体，看上去也不是没凝好的胶，然后点样的时候样品总是忘旁边的孔里跑，飘得特别厉害，大家有没有见过这种情况？有什么意见啊？求指教啊……
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1楼 2011-02-10 10:00:52
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惟我独尊

金虫 (小有名气)
★
gemmy冷心(金币+1):谢谢参与
引用回帖:
Originally posted by gemmy冷心 at 2011-02-10 02:00:52:
我做DGGE的时候，制胶之后点样孔里总是剩下一点液体，看上去也不是没凝好的胶，然后点样的时候样品总是忘旁边的孔里跑，飘得特别厉害，大家有没有见过这种情况？有什么意见啊？求指教啊……

把支架放入缓冲液后，用热缓冲液冲洗点样孔，上样时只要看着点 别上满样不就不会漂了吗，其实上样少一点不会影响结果的
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9楼2011-02-21 11:02:22
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reasonspare

木虫 (著名写手)
★ ★ ★
gemmy冷心(金币+1):谢谢参与
amisking(金币+2): good！ 2011-02-10 19:18:32
引用回帖:
Originally posted by gemmy冷心 at 2011-02-10 10:00:52:
我做DGGE的时候，制胶之后点样孔里总是剩下一点液体，看上去也不是没凝好的胶，然后点样的时候样品总是忘旁边的孔里跑，飘得特别厉害，大家有没有见过这种情况？有什么意见啊？求指教啊……

那是你的丙烯酰胺胶 凝固过程中产生的溶液，通常是高离子强度。
所以通常我们要用热的电泳缓冲液冲洗若干次。然后再上样。

小记：每个点样孔要清洗干净，否则不同的离子强度影响电泳的迁移率。
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2楼2011-02-10 10:14:41
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在雨中

金虫 (著名写手)
★
gemmy冷心(金币+1):谢谢参与
应该算是正常的，会有一点点胶不会凝固。你做好胶后把胶放在加热的电泳槽旁，高温会促进胶的凝固。如果很像块点凝固，就用电吹风吧，不过我不推荐这样。
加样的时候的样品飘到别的空也很常见。。。呵呵。。。注意动作轻就好了。。。
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5楼2011-02-10 12:53:26
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gemmy冷心

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by lordring at 2011-02-10 11:04:46:

可是飘得很严重呢 会很快量也挺大的 所以影响到旁边的样品结果呢
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6楼2011-02-12 09:53:11
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