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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】琼脂糖电泳1×TAE配的不好 用什么后果
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xnbioinfor

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】琼脂糖电泳1×TAE配的不好 用什么后果

取了20ml 50×TAE, 定容到1000ml， 晃了几下，然后就用来制胶了，但是PCR电泳的结果不好， 条带很弱，而且上午跑出来的几条带，竟然没跑出来。现在怀疑1×TAE没混匀，这样会导致什么样的后果呢？ TAE怎么配 才能让结果完美呢
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1楼 2011-01-18 10:17:58
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luckyzhumin

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
先要看下Marker条带是否清晰了，如果清晰，就是你DNA样品的问题了，如果Marker也不清晰，那就可能是染料与样品比例没控制好，也可能制胶时琼脂比例或缓冲液的问题了。
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12楼2013-03-17 22:06:58
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
★ ★
xnbioinfor(金币+1):谢谢参与
rainwander(金币+1): 鼓励积极参与交流~~~ 2011-01-18 15:08:14
引用回帖:
Originally posted by xnbioinfor at 2011-01-18 10:17:58:
取了20ml 50×TAE, 定容到1000ml， 晃了几下，然后就用来制胶了，但是PCR电泳的结果不好， 条带很弱，而且上午跑出来的几条带，竟然没跑出来。现在怀疑1×TAE没混匀，这样会导致什么样的后果呢？ TAE怎么配 才能让 ...

TAE没混匀，离子强度和pH就有问题，对电泳肯定有影响。
要让结果完美也不单单是TAE的问题了，各个步骤都要注意。
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2楼2011-01-18 10:34:25
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feng__

金虫 (著名写手)
★ ★ ★
xnbioinfor(金币+1):谢谢参与
silicare(金币+2): 谢谢参与 2011-01-18 15:32:58
MAKER有问题么？

貌似也不至于跑不出来条带吧，不匀的话应该是条带不是直的，歪歪扭扭的那样吧 ，呵呵，么试过#17
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3楼2011-01-18 10:35:50
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天使托

专家顾问 (职业作家)
★ ★
xnbioinfor(金币+1):谢谢参与
silicare(金币+1): 完全溶解很重要 2011-01-18 15:33:13
首先要确保缓冲液混匀了，然后溶胶也要完全溶解。
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4楼2011-01-18 10:46:14
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