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【求助/交流】琼脂糖电泳1×TAE配的不好 用什么后果
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xnbioinfor
铜虫
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(幼儿园)
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虫号: 952726
[交流]
【求助/交流】琼脂糖电泳1×TAE配的不好 用什么后果
取了20ml 50×TAE, 定容到1000ml, 晃了几下,然后就用来制胶了,但是PCR电泳的结果不好, 条带很弱,而且上午跑出来的几条带,竟然没跑出来。现在怀疑1×TAE没混匀,这样会导致什么样的后果呢? TAE怎么配 才能让结果完美呢
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2011-01-18 10:17:58
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luckyzhumin
新虫
(初入文坛)
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虫号: 2354970
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
先要看下Marker条带是否清晰了,如果清晰,就是你DNA样品的问题了,如果Marker也不清晰,那就可能是染料与样品比例没控制好,也可能制胶时琼脂比例或缓冲液的问题了。
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12楼
2013-03-17 22:06:58
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lxj341401
至尊木虫
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★ ★
xnbioinfor(金币
+1
):谢谢参与
rainwander(金币+1): 鼓励积极参与交流~~~ 2011-01-18 15:08:14
引用回帖:
Originally posted by
xnbioinfor
at 2011-01-18 10:17:58:
取了20ml 50×TAE, 定容到1000ml, 晃了几下,然后就用来制胶了,但是PCR电泳的结果不好, 条带很弱,而且上午跑出来的几条带,竟然没跑出来。现在怀疑1×TAE没混匀,这样会导致什么样的后果呢? TAE怎么配 才能让 ...
TAE没混匀,离子强度和pH就有问题,对电泳肯定有影响。
要让结果完美也不单单是TAE的问题了,各个步骤都要注意。
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2楼
2011-01-18 10:34:25
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feng__
金虫
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★ ★ ★
xnbioinfor(金币
+1
):谢谢参与
silicare(金币+2): 谢谢参与 2011-01-18 15:32:58
MAKER有问题么?
貌似也不至于跑不出来条带吧,不匀的话应该是条带不是直的,歪歪扭扭的那样吧 ,呵呵,么试过#17
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3楼
2011-01-18 10:35:50
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天使托
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xnbioinfor(金币
+1
):谢谢参与
silicare(金币+1): 完全溶解很重要 2011-01-18 15:33:13
首先要确保缓冲液混匀了,然后溶胶也要完全溶解。
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4楼
2011-01-18 10:46:14
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