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asdfghjkl-00

新虫 (初入文坛)

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[交流] 【求助/交流】求助DGGE的问题

我做了一次DGGE，条带是有的，但是跑的不是开，请问是什么原因？有什么解决办法？
电压时60V ，时间是12h，梯度是30%-70%

[ Last edited by asdfghjkl-00 on 2011-1-11 at 09:58 ]

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1楼 2011-01-11 09:56:43

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在雨中

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★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+2):很有经验啊~~~鼓励积极参与交流~~~ 2011-01-12 10:29:31

引用回帖:

Originally posted by asdfghjkl-00 at 2011-01-12 09:13:13:

有的条带已经跑到下边了，我怕再跑就出去了，所以想调整一下梯度，看是否可行？

你范了一个严重的概念错误。如果梯度合适，电泳时间再长DNA也不会跑出去的，因为DNA在它最合适的地方解链，迁移率非常低。
你的是不是细菌的DGGE？V3区的，这个梯度比较合适了。
真菌的话，大概20-50%的梯度。

你可以把你的上梯度弄大些，比如40-70%，但电泳时间要足够。我做的话，一般100-120V，12h。效果很好。