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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】PCR-DGGE
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小木木木虫

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】PCR-DGGE 已有1人参与

最近在做PCR-DGGE
先从PCR部分讨论遇到的问题
（一）PCR
1用了相同的体系条件，实验设备，为什么之前做的很好，后面做的越来越差（不是偶发事件，是总是越做越差），会不会是酶出了问题，期间放酶的冰箱有一次解冻，冰箱里的东西全化了，会不会有影响？








前








后
2新买回来的酶要不要分装？这样每次用就不用等酶全部溶解。
3为什么PCR产物会少很多，50微升的体系P出来损失了将近10微升
4分装的酶和混装的对DGGE有什么影响，我们做的混装的PCR检测结果比分装的亮
（二）DGGE
DGGE做了好久了，但就是做不出条带，期间去了南海所，他们那边用我们的PCR产物也做不出来，但拿到北京去，用我们提的DNA,在那边做PCR，结果DGGE跑出了很好的条带。所以我们想还是PCR出了问题
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1楼 2010-11-06 14:45:50
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daringhong

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+2):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-11-06 23:49:48
新买回来的酶如果量大的话，还是分装一下的好~~避免污染，也避免温度对它的影响。
你说的一直做不出来DGGE，应该还是PCR的问题。在PCR得到很好的结果的情况下，再做DGGE，一般都不会出现什么问题了
赞一下(2人) 回复此楼
每天进步一点点~~
2楼2010-11-06 21:22:09
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