应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】求助DGGE的问题
101/1返回列表
查看: 1141  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

asdfghjkl-00

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】求助DGGE的问题

我做了一次DGGE，条带是有的，但是跑的不是开，请问 是什么原因？有什么解决办法？
电压时60V ，时间是12h，梯度是30%-70%

[ Last edited by asdfghjkl-00 on 2011-1-11 at 09:58 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-01-11 09:56:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rainwander

铁杆木虫 (知名作家)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):说的是啊 2011-01-12 10:02:57
先做个垂直电泳，摸索一下最适梯度吧
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2011-01-11 10:38:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

suoyi001

铜虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+5):鼓励新虫交流 2011-01-11 14:08:53
asdfghjkl-00(金币+1): 2011-01-12 09:15:35
梯度不够啊，建议跑个梯度，跑的时间12h，有些长吧，我们都是4h。看看会不会是染色时间不够啊。
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2011-01-11 13:43:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

在雨中

金虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
asdfghjkl-00(金币+1): 2011-01-12 09:14:49
dhd997(金币+1):鼓励交流 2011-01-12 10:03:10
我如果是120V，才跑12h的，难道你的电泳时间不够？很有可能！
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2011-01-11 16:11:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hfkset

铜虫 (初入文坛)
不懂，学习一下
回复此楼
5楼2011-01-11 17:08:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

孟孟525

铁虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):恩，没错 2011-01-12 10:03:24
DGGE需要预先摸索条件的 时间电压 变性剂的浓度都很重要
赞一下(2人) 回复此楼
6楼2011-01-11 21:16:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

asdfghjkl-00

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by suoyi001 at 2011-01-11 13:43:25:
梯度不够啊，建议跑个梯度，跑的时间12h，有些长吧，我们都是4h。看看会不会是染色时间不够啊。

电压不大，所以跑的长，染色用的是EB，时间是20分钟，我也觉得是梯度的问题
赞一下 回复此楼
7楼2011-01-12 09:10:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

asdfghjkl-00

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by 在雨中 at 2011-01-11 16:11:08:
我如果是120V，才跑12h的，难道你的电泳时间不够？很有可能！

有的条带已经跑到下边了，我怕再跑就出去了，所以想调整一下梯度，看是否可行？
赞一下 回复此楼
8楼2011-01-12 09:13:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

在雨中

金虫 (著名写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+2):很有经验啊~~~鼓励积极参与交流~~~ 2011-01-12 10:29:31
引用回帖:
Originally posted by asdfghjkl-00 at 2011-01-12 09:13:13:

有的条带已经跑到下边了，我怕再跑就出去了，所以想调整一下梯度，看是否可行？

你范了一个严重的概念错误。如果梯度合适，电泳时间再长DNA也不会跑出去的，因为DNA在它最合适的地方解链，迁移率非常低。
你的是不是细菌的DGGE？V3区的，这个梯度比较合适了。
真菌的话，大概20-50%的梯度。

你可以把你的上梯度弄大些，比如40-70%，但电泳时间要足够。我做的话，一般100-120V，12h。效果很好。
赞一下(2人) 回复此楼
9楼2011-01-12 10:13:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

asdfghjkl-00

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by 在雨中 at 2011-01-12 10:13:08:


你范了一个严重的概念错误。如果梯度合适，电泳时间再长DNA也不会跑出去的，因为DNA在它最合适的地方解链，迁移率非常低。
你的是不是细菌的DGGE？V3区的，这个梯度比较合适了。
真菌的话，大概20-50%的梯度 ...

恩，好的，谢谢！
回复此楼
10楼2011-01-12 11:28:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 asdfghjkl-00 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的？ +17 爱看书的可乐 2026-08-26 19/950 2026-09-02 00:19 by xiangy672
[基金申请] 面上函评意见出来了，像什么等级？ 20+4 Tsingking1 2026-08-27 17/850 2026-09-01 19:51 by 超级无敌华子
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +5 bjdxyxy 2026-08-26 5/250 2026-09-01 17:54 by 小伟大博士
[基金申请] 学科评审组评审是指会评吗？ +4 瞬息宇宙 2026-08-31 4/200 2026-09-01 14:58 by jiaoxg
[论文投稿] 小白求助 投论文要求的highlights应该如何写 5+3 l1963982152 2026-08-29 4/200 2026-09-01 09:04 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 国社科又开始会评了，不知道这次命运如何 +7 雨打竹帘 2026-08-30 11/550 2026-08-31 23:16 by hittle2008
[基金申请] 基金未中，这种答复是模板吗？ +6 zhaosm1982 2026-08-27 7/350 2026-08-31 21:18 by qdxxmc
[基金申请] 哪位高人中了，把查询到的截图贴出来让我看看，让我长长见识 +6 yuleib84 2026-08-26 7/350 2026-08-31 19:46 by 鱼翔浅底1
[基金申请] 能否申诉？ +7 echo8914667 2026-08-30 8/400 2026-08-31 17:00 by yihongxu
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗？ +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 为什么到现在没收到通知？ +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 我不理解！ +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国际合作可查了，中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 牛来！米来！面来！ +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭