应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】RNA 荧光定量
101/1返回列表
查看: 1030  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

pidou213

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】RNA 荧光定量

请问大家做荧光定量的时候，是如何将RNA调解到相同的浓度的？？？

现在我们老师要求我们先测定RNA OD然后稀释成大致相同的浓度，再次测定OD，然后再次稀释成相同的浓度，因为中间增加了一个稀释的环节，又因为RNA很容易降解，所以想知道大家稀释的方法。


直接原始RNA溶液的OD值，利用算术方法将浓度稀释成统一的值，可以吗？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2011-01-10 00:17:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shaquila

金虫 (正式写手)
★
dhd997(金币+1):鼓励交流 2011-01-10 09:03:25
我没做个，但是实验室其它人做是用两部发，一开始稀释个大致浓度，然后测定OD值～～
反转第一链的时候，加入换算过等量的RNA作为模版进行反转，这也就没有问题了～
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-01-10 08:58:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

silicare

荣誉版主 (文坛精英)
★
dhd997(金币+1):谢谢交流 2011-01-10 09:03:36
用微量比色皿，测完浓度的RNA就扔了，不管他降不降解
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2011-01-10 09:00:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pidou213

木虫 (正式写手)
reasonspare:只需要1ul，就足够了。产品明NanoDrop. 2011-01-12 07:29:41
引用回帖:
Originally posted by silicare at 2011-01-10 09:00:43:
用微量比色皿，测完浓度的RNA就扔了，不管他降不降解

可是那样好可惜啊，浪费不起啊。我们一般一次也就100微升
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-01-10 20:44:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

silicare

荣誉版主 (文坛精英)
引用回帖:
Originally posted by pidou213 at 2011-01-10 20:44:39:



可是那样好可惜啊，浪费不起啊。我们一般一次也就100微升

所以要用微量比色皿，100ul里边加2ul RNA就可以了
赞一下 回复此楼
5楼2011-01-11 08:25:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

showcake2010

铜虫 (小有名气)

请问小鼠IL-8的基因序列（mRNA序列）或者ncbi上的NM序列号

reasonspare:请重新开帖，求助会更有效率 2011-01-12 07:32:24
请问各位大虾，如题，我在ncbi上找到了人的IL-8序列和NM号，
但是找不到小鼠的，想找到序列或NM号用来合成荧光定量PCR的引物。
ELISA检测试剂盒是有的，奇怪为什么序列找不到？
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2011-01-11 14:19:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pidou213

木虫 (正式写手)
reasonspare:不是蒙，nanodrop，一次测样只需要1-2 ul, 然后根据你需要的浓度，进行浓缩和稀释 2011-01-12 07:31:38
引用回帖:
Originally posted by silicare at 2011-01-11 08:25:21:



所以要用微量比色皿，100ul里边加2ul RNA就可以了

这样不停的蒙的话，恐怕不太好吧
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2011-01-12 00:13:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

silicare

荣誉版主 (文坛精英)
pidou213(金币+1):辛苦 2011-01-12 10:15:15
引用回帖:
Originally posted by pidou213 at 2011-01-12 00:13:58:



这样不停的蒙的话，恐怕不太好吧

算我没说
回复此楼
8楼2011-01-12 08:03:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bigboy123

铜虫 (小有名气)
★ ★
dhd997(金币+2):鼓励交流 2011-01-12 10:04:06
通过OD值来进行稀释，具体操作起来非常麻烦，而且不准。
建议你通过荧光PCR的Ct值来进行比较，可靠性稍微好点。
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2011-01-12 09:06:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pidou213

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by silicare at 2011-01-12 08:03:38:



算我没说

那个不太好吧

俺也没别的意思

只是讨论一下嘛
赞一下 回复此楼
10楼2011-01-12 10:14:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 pidou213 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 284求调剂 +8 天下熯 2026-02-28 8/400 2026-03-02 00:15 by 暮雨星晴
[考研] 材料学硕318求调剂 +5 February_Feb 2026-03-01 5/250 2026-03-01 23:31 by L135790
[考研] 0856材料与化工，270求调剂 +6 YXCT 2026-03-01 6/300 2026-03-01 23:21 by 向上的胖东
[基金申请] 成果系统访问量大，请一小时后再尝试。---NSFC啥时候好哦，已经两天这样了 +4 NSFC2026我来了 2026-02-28 4/200 2026-03-01 22:37 by 铁门栓
[考研] 299求调剂 +3 Y墨明棋妙Y 2026-02-28 5/250 2026-03-01 21:01 by tangxiaotian
[考研] 高分子化学与物理调剂 +6 好好好1233 2026-02-28 12/600 2026-03-01 19:48 by 好好好1233
[考研] 306分材料调剂 +4 chuanzhu川烛 2026-03-01 5/250 2026-03-01 19:48 by 无际的草原
[考研] 0856化工专硕求调剂 +12 董boxing 2026-03-01 12/600 2026-03-01 19:45 by 材子momo
[考研] 295求调剂 +7 19171856320 2026-02-28 7/350 2026-03-01 18:54 by 18137688336
[考研] 材料学调剂 +9 提神豆沙包 2026-02-28 11/550 2026-03-01 18:15 by ms629
[考研] 313求调剂 +3 水流年lc 2026-02-28 3/150 2026-03-01 16:01 by 新能源达人
[考研] 303求调剂 +4 今夏不夏 2026-03-01 4/200 2026-03-01 14:46 by 嘟嘟小浣熊
[考研] 求调剂 +6 repeatt?t 2026-02-28 6/300 2026-03-01 14:37 by Sakura绘
[考研] 298求调剂 +9 人间唯你是清欢 2026-02-28 12/600 2026-03-01 14:23 by Ducount.Y
[考研] 材料284求调剂，一志愿郑州大学英一数二专硕 +10 想上岸的土拨鼠 2026-02-28 10/500 2026-03-01 14:12 by yc258
[考博] 博士自荐 +4 kkluvs 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:19 by 馥安馥安
[硕博家园] 2025届双非化工硕士毕业，申博 +3 更多的是 2026-02-27 4/200 2026-03-01 10:04 by ztg729
[考研] 材料调剂 +4 爱擦汗的可乐冰 2026-02-28 4/200 2026-03-01 00:38 by 猫猫球alter
[考研] 276求调剂 +3 路lyh123 2026-02-28 4/200 2026-02-28 19:45 by 路lyh123
[高分子] 求环氧树脂研发1名 +3 孙xc 2026-02-25 11/550 2026-02-28 16:57 by ichall
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭