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weiminhb

铁虫 (小有名气)


[交流] 【求助/交流】关于SDS-PAGE的问题

我最近做SDS-PAGE,样品是假单胞菌全蛋白,跑出来的带上半部分有很多,下半部分几乎没有带。也就是说根据Marker,45KDa以上有很多蛋白,但是45以下几乎没有蛋白,这和以前的电泳结果是不符合的。请问是怎么回事呢?为什么较小的蛋白都没有跑出来?

    还有就是:我按一本书上的方法,用沸水浴处理样品时,结果什么带都没有,是沸水把蛋白破坏了吗?现在95℃处理样品,有带,感觉温度也差不了多少啊。请高人指点

[ Last edited by weiminhb on 2011-1-8 at 22:51 ]
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xuqingchun33

银虫 (小有名气)



rainwander(金币+1):鼓励积极参与交流~~~ 2011-01-10 12:02:41
电压的问题,再者染胶的问题,再者做个空载体的蛋白对照,再者蛋白的浓度,如果你要的是小分子蛋白,建议做TRICINE-SDS
3楼2011-01-10 09:38:58
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rainwander(金币+1):鼓励积极参与~~~ 2011-01-09 08:58:24
沸水只能把蛋白变性,不能降解的。不知道你胶的浓度是多少,浓度低了分子量小的蛋白分不开的,全跑到最前沿去了。
2楼2011-01-08 23:33:25
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wuw579

铁杆木虫 (正式写手)


胶浓度要适用而且电泳时间也很重要
5楼2011-01-17 21:17:48
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