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weiminhb

铁虫 (小有名气)

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虫号: 831698

[交流] 【求助/交流】关于SDS-PAGE的问题

我最近做SDS-PAGE，样品是假单胞菌全蛋白，跑出来的带上半部分有很多，下半部分几乎没有带。也就是说根据Marker，45KDa以上有很多蛋白，但是45以下几乎没有蛋白，这和以前的电泳结果是不符合的。请问是怎么回事呢？为什么较小的蛋白都没有跑出来？

还有就是：我按一本书上的方法，用沸水浴处理样品时，结果什么带都没有，是沸水把蛋白破坏了吗？现在95℃处理样品，有带，感觉温度也差不了多少啊。请高人指点

[ Last edited by weiminhb on 2011-1-8 at 22:51 ]

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1楼 2011-01-08 22:37:57

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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

★
rainwander(金币+1):鼓励积极参与~~~ 2011-01-09 08:58:24

沸水只能把蛋白变性，不能降解的。不知道你胶的浓度是多少，浓度低了分子量小的蛋白分不开的，全跑到最前沿去了。

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2楼2011-01-08 23:33:25

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xuqingchun33

银虫 (小有名气)

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在线: 76.7小时
虫号: 918005

★
rainwander(金币+1):鼓励积极参与交流~~~ 2011-01-10 12:02:41

电压的问题，再者染胶的问题，再者做个空载体的蛋白对照，再者蛋白的浓度，如果你要的是小分子蛋白，建议做TRICINE-SDS

赞一下(1人)

3楼2011-01-10 09:38:58

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hfkset

铜虫 (初入文坛)

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在线: 4.5小时
虫号: 834438

有图片吗

4楼2011-01-10 14:02:10

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wuw579

铁杆木虫 (正式写手)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 6643.2
帖子: 344
在线: 102.1小时
虫号: 1188591

胶浓度要适用而且电泳时间也很重要

5楼2011-01-17 21:17:48

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