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yabing0324

金虫 (职业作家)


[交流] 【求助/交流】大家帮我分析一下,为什么PCR产物电泳拖尾严重

PCR体系:总体积25μL; MgCl2,1.6μL;  Taq buffer 2.5μL; dNTP 2μL; Taq酶0.2μL; 上下游引物和模板各1μL
Marker 为DL2000

模板的浓度为50ng/μL,260/280 为1.86, 260/230为1.2
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翱宇

禁虫 (正式写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你样品第4、5和最后一道没有拖尾,所以可以排除是跑胶、加样方面的技术问题,应该是你样品PCR扩增的特异性问题。拖后的条带会是什么这点很重要?
是取样时有酶蛋白拖住了PCR样品吗?还是其他的问题,这个还是有经验的人给你意见吧,建议自己也去网上查查!
11楼2011-01-04 22:43:34
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dyb831029

铜虫 (小有名气)


yabing0324(金币+1): 2011-01-03 21:26:15
大家给点建议!
2楼2011-01-03 18:49:19
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yabing0324(金币+3): 2011-01-03 21:26:31
你点的太多了,点样量可以稍微减少一点!看你PCR条带比较亮所以没有必要多点!
3楼2011-01-03 19:04:03
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lpfxmc

木虫 (初入文坛)


yabing0324(金币+3): 2011-01-03 21:26:38
模板量也有点大,可以考虑减少模板量
4楼2011-01-03 20:37:20
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