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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】大家帮我分析一下，为什么PCR产物电泳拖尾严重
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yabing0324

金虫 (职业作家)

[交流] 【求助/交流】大家帮我分析一下，为什么PCR产物电泳拖尾严重

PCR体系：总体积25μL； MgCl2,1.6μL；  Taq buffer 2.5μL； dNTP 2μL； Taq酶0.2μL； 上下游引物和模板各1μL
Marker 为DL2000

模板的浓度为50ng/μL，260/280 为1.86, 260/230为1.2
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1楼2011-01-03 17:57:08
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yabing0324

金虫 (职业作家)
引用回帖:
Originally posted by dyb831029 at 2011-01-03 18:49:19:
大家给点建议！

谢谢O(∩_∩)O
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6楼2011-01-03 21:28:01
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yabing0324

金虫 (职业作家)
引用回帖:
Originally posted by 天使托 at 2011-01-03 19:04:03:
你点的太多了，点样量可以稍微减少一点！看你PCR条带比较亮所以没有必要多点！

谢谢，我用中孔梳子，点5微升的样
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7楼2011-01-03 21:38:21
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yabing0324

金虫 (职业作家)
引用回帖:
Originally posted by susizheng at 2011-01-03 20:41:29:
上样量大就这样，正常现象，特异性条带很明显，切胶回收就是。

好的，非常感谢！
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8楼2011-01-03 21:39:02
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yabing0324

金虫 (职业作家)
引用回帖:
Originally posted by lpfxmc at 2011-01-03 20:37:20:
模板量也有点大，可以考虑减少模板量

谢谢建议，下次我试一试
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9楼2011-01-03 21:40:17
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yabing0324

金虫 (职业作家)
今天上样量减少到4微升，还是不行，还拖
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10楼2011-01-04 21:57:42
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