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晶晶虫

金虫 (小有名气)


[交流] 【求助/交流】原核表达 诱导时间的长短影不影响蛋白的活性啊?

问一个菜鸟问题啊
原核表达在Ecoli BL21中表达目的蛋白
IPTG诱导时间的长短会不会影不影响蛋白的活性啊?
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dhd997(金币+1):鼓励交流 2011-01-03 09:45:07
晶晶虫(金币+2): 2011-02-15 19:28:05
一般不会有啥影响的,37度一般不超10个小时,25度可以过夜。
2楼2011-01-03 09:00:04
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dhd997(金币+1):谢谢交流 2011-01-03 10:38:05
晶晶虫(金币+2): 2011-02-15 19:27:59
当然会影响的,而且很诱导剂浓度、诱导温度也有关系。
3楼2011-01-03 10:19:20
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wuchuanju

新虫 (初入文坛)


晶晶虫(金币+2): 2011-02-15 19:27:54
会影响的,时间长短及其浓度都可以影响
4楼2011-01-04 14:07:46
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rainwander

铁杆木虫 (知名作家)


晶晶虫(金币+2): 2011-01-06 06:00:58
时间的长短对活性的影响不太清楚

但是时间对表达量肯定是会有影响的
5楼2011-01-04 16:04:48
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yu棒棒

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
1670097楼: Originally posted by lxj341401 at 2011-01-03 10:19:20
当然会影响的,而且很诱导剂浓度、诱导温度也有关系。

请教下,一般25度iptg诱导多少时间对蛋白的比较好。30度呢?

我用37度iptg诱导5h,出现了大量包涵体,但换18度诱导40h,表达量却很低,上清沉淀里的表达量都很少,所以想用25度和30度试试。。。
6楼2013-03-12 10:53:37
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
1987633楼: Originally posted by yu棒棒 at 2013-03-12 10:53:37
请教下,一般25度iptg诱导多少时间对蛋白的比较好。30度呢?

我用37度iptg诱导5h,出现了大量包涵体,但换18度诱导40h,表达量却很低,上清沉淀里的表达量都很少,所以想用25度和30度试试。。。...

6-10h,因蛋白而异,没有特定的规律,要摸索的。
7楼2013-03-13 07:39:20
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