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晶晶虫

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】原核表达 诱导时间的长短影不影响蛋白的活性啊？

问一个菜鸟问题啊
原核表达在Ecoli BL21中表达目的蛋白
IPTG诱导时间的长短会不会影不影响蛋白的活性啊？
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1楼 2011-01-03 04:05:50
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)
★
dhd997(金币+1):鼓励交流 2011-01-03 09:45:07
晶晶虫(金币+2): 2011-02-15 19:28:05
一般不会有啥影响的，37度一般不超10个小时，25度可以过夜。
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2楼2011-01-03 09:00:04
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
★
dhd997(金币+1):谢谢交流 2011-01-03 10:38:05
晶晶虫(金币+2): 2011-02-15 19:27:59
当然会影响的，而且很诱导剂浓度、诱导温度也有关系。
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3楼2011-01-03 10:19:20
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wuchuanju

新虫 (初入文坛)
晶晶虫(金币+2): 2011-02-15 19:27:54
会影响的，时间长短及其浓度都可以影响
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4楼2011-01-04 14:07:46
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rainwander

铁杆木虫 (知名作家)
晶晶虫(金币+2): 2011-01-06 06:00:58
时间的长短对活性的影响不太清楚

但是时间对表达量肯定是会有影响的
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5楼2011-01-04 16:04:48
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yu棒棒

新虫 (初入文坛)
★
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引用回帖:
1670097楼: Originally posted by lxj341401 at 2011-01-03 10:19:20
当然会影响的，而且很诱导剂浓度、诱导温度也有关系。

请教下，一般25度iptg诱导多少时间对蛋白的比较好。30度呢？

我用37度iptg诱导5h，出现了大量包涵体，但换18度诱导40h，表达量却很低，上清沉淀里的表达量都很少，所以想用25度和30度试试。。。
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6楼2013-03-12 10:53:37
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
1987633楼: Originally posted by yu棒棒 at 2013-03-12 10:53:37
请教下，一般25度iptg诱导多少时间对蛋白的比较好。30度呢？

我用37度iptg诱导5h，出现了大量包涵体，但换18度诱导40h，表达量却很低，上清沉淀里的表达量都很少，所以想用25度和30度试试。。。...

6-10h，因蛋白而异，没有特定的规律，要摸索的。
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7楼2013-03-13 07:39:20
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