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【求助】多孔材料中细胞全液的提取方法
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王庭
木虫
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【求助】多孔材料中细胞全液的提取方法
我主要是做生物材料偏颇于生物检测这块的。为了将材料上的细胞和培养瓶中的细胞生长状况进行大分子方面的对比,就需要得到全细胞提取液以及RNA等。但是我在多孔材料中培养的细胞,粘附性太好了,导致用胰酶很难清洗下来,又不能消化太久,所以也就很难得到全细胞提取液,我尝试在材料中破碎细胞直接进行全液提取,可是结果也不太好。哪位正在做,或者头脑极为强大的大侠给出出主意啊,感激涕零哦~~~
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2010-12-27 20:09:55
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dhd997
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americanyk(金币+1):欢迎常来 2011-01-15 19:06:19
引用回帖:
Originally posted by
王庭
at 2011-01-12 20:21:33:
我之前确实也尝试了这个方法,当然这个方法也在我所有方法里面相对来说是最好的一个。只是由于是多孔材料,在清洗上面的培养液的时候不能像常规提取蛋白的方法那样可以PBS清洗、Washing buffer 清洗等等进行一系 ...
贵在探索,加油
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7楼
2011-01-12 20:22:13
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王庭
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请大家多多帮忙啊,给点建议,做了近两个月了,结果一直不好,头大啊~
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2楼
2010-12-27 20:15:34
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yusen_1982(金币+1):欢迎讨论! 2011-01-08 23:50:34
王庭(金币+2):谢谢哦 2011-01-12 20:12:01
为什么不试一下将细胞-材料放在液氮里面研磨,然后制成悬液,反复冻融裂解细胞,最后离心收集上清?
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3楼
2011-01-08 21:46:58
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yusen_1982(金币+1):欢迎讨论! 2011-01-08 23:50:40
王庭(金币+2):谢谢了哦 2011-01-12 20:16:02
用细胞裂解液试试,把细胞全部裂解。
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4楼
2011-01-08 21:55:58
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