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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 前沿资讯 » 【求助】多孔材料中细胞全液的提取方法
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王庭

木虫 (著名写手)

[交流] 【求助】多孔材料中细胞全液的提取方法

我主要是做生物材料偏颇于生物检测这块的。为了将材料上的细胞和培养瓶中的细胞生长状况进行大分子方面的对比，就需要得到全细胞提取液以及RNA等。但是我在多孔材料中培养的细胞，粘附性太好了，导致用胰酶很难清洗下来，又不能消化太久，所以也就很难得到全细胞提取液，我尝试在材料中破碎细胞直接进行全液提取，可是结果也不太好。哪位正在做，或者头脑极为强大的大侠给出出主意啊，感激涕零哦~~~Sample Text
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1楼 2010-12-27 20:09:55
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诺曼底1227

铁杆木虫 (正式写手)
★
yusen_1982(金币+1):欢迎讨论！ 2011-01-08 23:50:34
王庭(金币+2):谢谢哦 2011-01-12 20:12:01
为什么不试一下将细胞-材料放在液氮里面研磨，然后制成悬液，反复冻融裂解细胞，最后离心收集上清？
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3楼2011-01-08 21:46:58
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王庭

木虫 (著名写手)
请大家多多帮忙啊，给点建议，做了近两个月了，结果一直不好，头大啊~
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2楼2010-12-27 20:15:34
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dhd997

荣誉版主 (文坛精英)
★
yusen_1982(金币+1):欢迎讨论！ 2011-01-08 23:50:40
王庭(金币+2):谢谢了哦 2011-01-12 20:16:02
用细胞裂解液试试，把细胞全部裂解。
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4楼2011-01-08 21:55:58
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王庭

木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by 诺曼底1227 at 2011-01-08 21:46:58:
为什么不试一下将细胞-材料放在液氮里面研磨，然后制成悬液，反复冻融裂解细胞，最后离心收集上清？

我用的材料基体是碳，一旦研磨之后生成的碳粉一是会对细胞的蛋白产生影响，再就是在裂解后离心时，碳粉很难粘附在离心管底部，也就是说很不容易分离。
唉唉！！呵呵，仍旧要谢谢你呢~
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5楼2011-01-12 20:15:29
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