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hnndpt

铁虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】PCR反应体系请教! 已有10人参与

最近在扩增基因,用如下程序,扩好多次都没结果,只有引物2聚体,大家帮看下反应程序有无问题。
   
                    水: 12.2微升
                    10*buffer: 2微升
                    DNTP:2微升
                    引物F(5PM): 0.8微升
                      引物R(5PM): 0.8微升
                       Taq:  0.2微升
                       CDNA模板:2微升
早上来老板说酶加少了,应该加2微升,引物应该提高到4微升。排队等PCR仪中,哪位高人看下,体系还有什么需要优化的?
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xuqingchun33

银虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):鼓励交流 2010-12-28 09:03:37
模板 的浓度可能太低,需要加大模板的用量
在这个纷绕的世俗世界里,能够学会用一颗平常的心去对待周围的一切,也是一种境界。
11楼2010-12-28 08:59:28
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