应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】16sRNA怎么提取？以及相关名词不太懂。求助！
171/2返回列表12下一页
查看: 2065  |  回复: 16
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

QQ84508540

捐助贵宾 (小有名气)

强迫症患者

[交流] 【求助/交流】16sRNA怎么提取？以及相关名词不太懂。求助！ 已有8人参与

各位虫友，我也是初涉这个领域，对16sRNA提取有很多不理解，虽然知道诸如PCR等知识的原理，但是在具体提取过程中，还是不太清楚其步骤，更没做过了，像使用的TE、PCR反应体系、TE一RNaseA、EBbuffe……等不太懂，还有构建引物是根据什么去做，或者选择，试剂盒是怎么回事，要想拿到公司去测序，我需要做到哪步后再送过去测序？

貌似问题有点弱弱的，但是真的不太懂，百度搜出来一大片，不如请虫友通俗的讲讲，谢谢帮忙。

要是有此类实验的具体步骤的课件或者实验设计，希望能给予分享，谢谢啦。

我需要做的菌种是一种芽孢杆菌，具体是什么类型还不清楚。

邮箱：84508540@163.com

[ Last edited by QQ84508540 on 2010-8-31 at 22:18 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
★★★★★从☆小☆学☆生☆做☆起！★★★★★
1楼 2010-08-31 22:16:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

won7

金虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
silicare(金币+1):非常正确 2010-09-01 08:16:04
感觉这位虫友对分子生物的知识和技术知之甚少，建议先看一点有关分子生物学的书再做，从基础开始。如果身边有人做分子生物学实验，最好向他们请教，这样事半功倍。在这里你一无了解，让人怎么教啊！
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2010-08-31 22:31:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

QQ84508540

捐助贵宾 (小有名气)

强迫症患者
引用回帖:
Originally posted by won7 at 2010-08-31 22:31:45:
感觉这位虫友对分子生物的知识和技术知之甚少，建议先看一点有关分子生物学的书再做，从基础开始。如果身边有人做分子生物学实验，最好向他们请教，这样事半功倍。在这里你一无了解，让人怎么教啊！

这个，呵呵，的确说的对哦~分子生物学学过点，的确知之甚少，做的更少了，现在涉及到这方面的了，着急呀~~哎……有没有类似实验的实验步骤什么的，自学应该还是很有信心的，谢谢你的帮助哦~
赞一下 回复此楼
★★★★★从☆小☆学☆生☆做☆起！★★★★★
3楼2010-09-01 00:31:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

虫子火箭兵

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
silicare(金币+1):非常好的idea~ 2010-09-01 08:16:24
去知网CNKI上找一些研博士的相关毕业论文，那些文章一般步骤讲的比较清楚
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2010-09-01 07:41:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

QQ84508540

捐助贵宾 (小有名气)

强迫症患者
引用回帖:
Originally posted by 虫子火箭兵 at 2010-09-01 07:41:17:
去知网CNKI上找一些研博士的相关毕业论文，那些文章一般步骤讲的比较清楚

好的，谢谢提醒哦~嘿嘿

正在努力看
赞一下 回复此楼
★★★★★从☆小☆学☆生☆做☆起！★★★★★
5楼2010-09-01 10:34:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

linxi8579

铜虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
不明白提RNA跟PCR有什么关系啊，楼主要做什么啊？
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2010-09-01 11:39:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

QQ84508540

捐助贵宾 (小有名气)

强迫症患者
引用回帖:
Originally posted by linxi8579 at 2010-09-01 11:39:16:
不明白提RNA跟PCR有什么关系啊，楼主要做什么啊？

提取→扩增→测序→鉴定。
芽孢杆菌这样做能鉴定到种吗？
赞一下 回复此楼
★★★★★从☆小☆学☆生☆做☆起！★★★★★
7楼2010-09-01 11:42:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

linxi8579

铜虫 (正式写手)
★
silicare(金币+1):谢谢参与 2010-09-01 12:15:18
引用回帖:
Originally posted by QQ84508540 at 2010-09-01 11:42:32:



提取、扩增、测序、鉴定。

你是要测序RNA对应的表达的DNA对吧，步骤应该是提取、反转、PCR、回收后测序鉴定。如果说测序RNA一般没有你这样的，一般是测序小RNA，这个东西提出来给公司测，大体过程就是加接头、反转、PCR、测序。
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2010-09-01 11:46:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

QQ84508540

捐助贵宾 (小有名气)

强迫症患者
引用回帖:
Originally posted by linxi8579 at 2010-09-01 11:46:03:

你是要测序RNA对应的表达的DNA对吧，步骤应该是提取、反转、PCR、回收后测序鉴定。如果说测序RNA一般没有你这样的，一般是测序小RNA，这个东西提出来给公司测，大体过程就是加接头、反转、PCR、测序。

嗯，是的测16sRNA即可，就是前面提取的实验步骤不太会，不知道该怎么做，从网上也没找到细菌的，只有酵母的，而且需要液氮，我这没有这个东东哦~只要做到扩增完然后拿去测序就行。
赞一下 回复此楼
★★★★★从☆小☆学☆生☆做☆起！★★★★★
9楼2010-09-01 11:56:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaoyu2881

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by QQ84508540 at 2010-09-01 11:42:32:



提取→扩增→测序→鉴定。
芽孢杆菌这样做能鉴定到种吗？

测序之后在NCBI里进行序列比对，选择合适的参比菌株，如果需要可以构建系统发育树，基本上都可以鉴定到种。祝楼主好运!
赞一下(1人) 回复此楼
Thatislife,onlylifehurts.
10楼2010-09-01 22:42:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 学员qSVDor 的主题更新
171/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085600材料工程一志愿中科大总分312求调剂 +7 吃宵夜1 2026-02-28 9/450 2026-02-28 19:15 by 公瑾逍遥
[考博] 博士推荐 +5 花儿笑? 2026-02-21 6/300 2026-02-28 18:53 by nxgogo
[考研] 298求调剂 +6 人间唯你是清欢 2026-02-28 8/400 2026-02-28 18:52 by 人间唯你是清欢
[考研] 0856材料求调剂 +10 hyf hyf hyf 2026-02-28 11/550 2026-02-28 18:50 by 无际的草原
[考研] 311求调剂 +7 南迦720 2026-02-28 7/350 2026-02-28 18:28 by leonnulll
[考研] 285求调剂 +5 满头大汗的学生 2026-02-28 5/250 2026-02-28 18:10 by 材料专硕调剂；
[考研] 求调剂 +3 repeatt?t 2026-02-28 3/150 2026-02-28 18:00 by houyaoxu
[考研] 化工专硕348，一志愿985求调剂 +3 弗格个 2026-02-28 5/250 2026-02-28 17:04 by sandychj
[考博] 博士自荐 +3 kkluvs 2026-02-28 3/150 2026-02-28 16:59 by StarAura
[考研] 265分求调剂不调专业和学校有行学上就 +4 礼堂丁真258 2026-02-28 6/300 2026-02-28 16:18 by 求调剂zz
[考博] 26申博 +3 想申博！ 2026-02-26 3/150 2026-02-28 16:07 by nxgogo
[考研] 295求调剂 +4 19171856320 2026-02-28 4/200 2026-02-28 13:39 by ms629
[考研] 290求调剂 +4 材料专硕调剂； 2026-02-28 5/250 2026-02-28 13:32 by houyaoxu
[考研] 0856调剂 +3 刘梦微 2026-02-28 3/150 2026-02-28 13:22 by houyaoxu
[考研] 304求调剂 +5 曼殊2266 2026-02-28 6/300 2026-02-28 12:44 by 迷糊CCPs
[硕博家园] 博士自荐 +6 科研狗111 2026-02-26 9/450 2026-02-28 12:32 by seaskyy
[考研] 272求调剂 +3 田智友 2026-02-28 3/150 2026-02-28 12:31 by 王加浩to
[基金申请] 什么是人一生最重要的？ +10 瞬息宇宙 2026-02-21 10/500 2026-02-27 08:46 by tfang
[基金申请] 面上可以超过30页吧？ +12 阿拉贡aragon 2026-02-22 13/650 2026-02-26 22:09 by Hahaxia
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭