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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】求经验人士解答一下连接转化目的片段加量问题，谢谢。。。
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一笑35

铁虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】求经验人士解答一下连接转化目的片段加量问题，谢谢。。。 已有3人参与

我的目的片段大概是1100bp左右，想问一下经验人士10微升的连接体系中，目的片段大概加多少量呢（用的是天根连接试剂盒）？  十分感谢。。。
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努力学习，充实自己！
1楼 2010-12-08 15:36:03
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):鼓励交流 2010-12-08 18:21:29
测浓度或跑电泳定量，摩尔浓度越为载体浓度5倍左右最好。
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Thank-you，so-blue.
2楼2010-12-08 16:47:06
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nkk12345

木虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+2):谢谢交流 2010-12-08 18:21:40
你的目的片段是1100bp，你的载体是多少，一般添加量为目的片段：载体=6：1（摩尔比），10微升体系的总DNA的添加量为100ng，你根据你的比例添加就好了
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2010-12-08 17:26:54
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一笑35

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by nkk12345 at 2010-12-08 17:26:54:
你的目的片段是1100bp，你的载体是多少，一般添加量为目的片段：载体=6：1（摩尔比），10微升体系的总DNA的添加量为100ng，你根据你的比例添加就好了

PGM-T载体约50ng/微升，我想直接知道你们的经验值，就不用推算了，呵呵，，
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努力学习，充实自己！
4楼2010-12-08 17:43:02
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