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一笑35

铁虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】求经验人士解答一下连接转化目的片段加量问题,谢谢。。。 已有3人参与

我的目的片段大概是1100bp左右,想问一下经验人士10微升的连接体系中,目的片段大概加多少量呢(用的是天根连接试剂盒)?  十分感谢。。。
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):鼓励交流 2010-12-08 18:21:29
测浓度或跑电泳定量,摩尔浓度越为载体浓度5倍左右最好。
Thank-you,so-blue.
2楼2010-12-08 16:47:06
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nkk12345

木虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
dhd997(金币+2):谢谢交流 2010-12-08 18:21:40
你的目的片段是1100bp,你的载体是多少,一般添加量为目的片段:载体=6:1(摩尔比),10微升体系的总DNA的添加量为100ng,你根据你的比例添加就好了
3楼2010-12-08 17:26:54
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一笑35

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by nkk12345 at 2010-12-08 17:26:54:
你的目的片段是1100bp,你的载体是多少,一般添加量为目的片段:载体=6:1(摩尔比),10微升体系的总DNA的添加量为100ng,你根据你的比例添加就好了

PGM-T载体约50ng/微升,我想直接知道你们的经验值,就不用推算了,呵呵,,
努力学习,充实自己!
4楼2010-12-08 17:43:02
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