24小时热门版块排行榜    

查看: 1922  |  回复: 3

youth1314

木虫 (职业作家)

[交流] 【求助/交流】关于酶切位点前添加保护碱基 已有3人参与

本人设计了一对引物,正向引物GC含量47.8%,5'端加酶切位点Bgl2;反向引物GC含量为38.1%,3'端添加酶切位点BstE2。本人想在酶切位点上添加保护碱基,加什么碱基比较合适,请各位高手赐教。谢谢!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

happyeveryday!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

youth1314

木虫 (职业作家)

更正一下

本人设计了一对引物,正向引物GC含量47.8%,5'端加酶切位点Bgl2;反向引物GC含量为38.1%,5'端添加酶切位点BstE2。本人想在酶切位点上添加保护碱基,加什么碱基比较合适,请各位高手赐教。谢谢!

[ Last edited by youth1314 on 2010-12-6 at 22:41 ]
happyeveryday!
2楼2010-12-06 22:36:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
rainwander(金币+1):鼓励参与解答 2010-12-06 23:35:58
推荐
Bgl II    GGAAGATCTTCC
BstE II         G GGT(A/T)ACC C
如果直接PCR产物直接酶切做连接的话我觉得BstE II 的保护碱基换成ACTG

[ Last edited by susizheng on 2010-12-6 at 23:18 ]
Thank-you,so-blue.
3楼2010-12-06 23:16:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
rainwander(金币+1):鼓励参与解答 2010-12-06 23:35:43
http://www.cnbiotech.com/html/dna/20071014/2509.html

呵呵,看看上面这个链接吧。

顺便说一下,你选择的这个BstE2酶效率很低,加上保护碱基后20hrs才能切10%。可以考虑换别的效率高的酶 EcoR I   BamH I   Nhe I  等等。
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
4楼2010-12-06 23:16:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 youth1314 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 6/300 2026-08-14 22:32 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +6 启萌科技 2026-08-12 21/1050 2026-08-14 19:48 by 启萌科技
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +6 Tide man 2026-08-14 7/350 2026-08-14 18:36 by 正能量1斤
[基金申请] filecode +6 cratir 2026-08-14 10/500 2026-08-14 18:29 by 笑叹辞穷
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[基金申请] 好奇怪的filecode +6 布布和一二 2026-08-08 7/350 2026-08-14 13:38 by Equinoxhua
[硕博家园] 请教兼职经验 +3 是阿文鸭 2026-08-09 3/150 2026-08-14 12:07 by HER12025
[论文投稿] 职称评审,求友友推荐见刊最快的期刊 +5 工厂打螺丝 2026-08-08 5/250 2026-08-14 11:03 by 玖戈弋
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +10 Tide man 2026-08-10 11/550 2026-08-14 10:30 by 沁言学术
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +10 家与远方 2026-08-10 15/750 2026-08-14 02:08 by 绵羊哥哥
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +9 majunge000 2026-08-10 12/600 2026-08-13 23:20 by iwuli
[文学芳草园] 阿姨 +4 汪汪锅 2026-08-09 4/200 2026-08-13 19:43 by arzu_hma
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于filecode,很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
信息提示
请填处理意见