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【求助/交流】连接转化时遇到的奇怪问题 求解
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jerrity
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[交流]
【求助/交流】连接转化时遇到的奇怪问题 求解
pcr片段胶回收后,双酶切,直接连接一个用同样的两种酶切的载体,转化感受态细胞JM109,在含卡那霉素的板上长出6个菌落,提质粒发现没有质粒,求解
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2010-12-06 15:06:10
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magy2006
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dhd997(金币+1):鼓励交流 2010-12-06 15:50:07
jerrity(金币+1): 2010-12-06 20:43:37
长出来的是杂菌,很正常,如果长出的都是阳性菌,何须检测?随便挑一个用就是了!
你的问题应该出在回收产物上(有没有回收到?)或者是转化上(热激?电击?),只要酶切的不错,总会长出来的,努力吧
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2010-12-06 15:37:28
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jerrity
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引用回帖:
Originally posted by
feng__
at 2010-12-06 15:20:24:
重新来····
已经做了两次了 想不明白 为什么没有治理 还有抗性
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3楼
2010-12-06 15:21:44
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dhmdddd
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dhd997(金币+1):鼓励交流 2010-12-06 15:50:16
jerrity(金币+1): 2010-12-06 20:43:46
jerrity(金币+2): 2011-04-25 18:47:35
假阳性了,pcr产物直接酶切的效果总是不是很好,试试连到T载体上面再酶切吧,效果很好的!
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5楼
2010-12-06 15:43:25
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xuqingchun33
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jerrity(金币+1): 2010-12-06 20:50:29
做个阳性和阴性对照看看
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2010-12-06 16:07:14
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