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wwling

铜虫 (小有名气)


[交流] 【求助/交流】帮忙看下定量PCR 溶解曲线和电泳问题 已有2人参与

做定量PCR,用的普通的taq酶加赛百盛的sybr green I 染料做的 仪器是rotor gene 6000

溶解曲线见下图

其中 蓝色的是质粒,其余是样品

以下是对应的荧光定量产物电泳图 挨着marker的是质粒 其余是样品(实在不好意思,图有点难看,大家将就吧~ )



想问问大家 为什么溶解曲线显示样品有峰,电泳却是涂抹带呢?而且不知什么原因 样品溶解曲线主峰位置总和质粒相差1度左右(我的样品是宏基因组DNA)
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wwling

铜虫 (小有名气)


沉了 自己顶起 希望大家给点想法建议啊
2楼2010-12-02 12:11:32
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沙中清泉

木虫 (正式写手)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
差一度可能是你的质粒PCR产物和样品PCR产物有差异导致
3楼2010-12-02 14:52:18
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wwling

铜虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by 沙中清泉 at 2010-12-02 14:52:18:
差一度可能是你的质粒PCR产物和样品PCR产物有差异导致

谢谢~~
   那对于一个基因来说,是不是不应该有这个差异?不过,按理说即使是同一个基因,产物组成略有差别,应该也会导致TM变化? 求解~
4楼2010-12-02 15:04:12
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沙中清泉

木虫 (正式写手)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by wwling at 2010-12-02 15:04:12:

   谢谢~~
   那对于一个基因来说,是不是不应该有这个差异?不过,按理说即使是同一个基因,产物组成略有差别,应该也会导致TM变化? 求解~

TM只与产物组成有关,可以测序看看
5楼2010-12-03 15:14:35
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