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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】RNA电泳
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llxxdl620

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】RNA电泳

我从细胞里提取了RNA ,跑电泳，但是连Mark都跑不好，不知道是什么原因，大家都是怎么跑的呢？
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1楼 2010-11-27 18:15:47
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

gyesang

荣誉版主 (著名写手)
★
dhd997(金币+1):鼓励上图交流 2010-11-30 15:02:01
用1.3%的琼脂糖胶，加EB，然后跑胶，跟跑DNA一样，Marker用RNA的，其他没有什么特别的 附一张我跑的RNA图片



[ Last edited by gyesang on 2010-11-28 at 20:49 ]
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7楼2010-11-28 16:53:18
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普通回帖

skkyy88888

铜虫 (著名写手)
Mark都跑不好？那把你的所有溶液都重新配下吧。电泳条件摸好。
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2楼2010-11-27 20:54:33
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holyala

木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★
scelab(金币+5):high hand~ :tiger23: 2010-11-27 23:21:15
llxxdl620(金币+10): 2010-11-28 09:13:56


这是2.5%的琼脂糖，120V，45min的电泳结果，两边是DNA marker，中间是RNA。

其实RNA电泳也没什么，缓冲液用DPEC水配，配胶也用这个缓冲液配，电泳槽用10%的双氧水泡15min，操作时戴手套口罩，其它就和DNA电泳一样了。
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3楼2010-11-27 22:03:08
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gao-feng

铁杆木虫 (著名写手)
用专用于RNA的电泳槽跑啊
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4楼2010-11-27 23:09:05
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ben1147

木虫 (正式写手)
★
dhd997(金币+1):鼓励交流 2010-11-30 15:01:43
跑RNA加marker没什么用，除非是跑甲醛变性琼脂糖胶，并且用RNA marker。就算这样也没什么意思，就那么几条带，大小不用关心，直接根据RNA的带型就能分析出来问题
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5楼2010-11-28 15:46:24
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jhu132llh

荣誉版主 (知名作家)
★
dhd997(金币+1):谢谢交流 2010-11-30 15:01:50
RNA我们都是不怎么跑胶测定的
一般都是上机做个RNA浓度测定，1ul就能测定
然后反转到cDNA在做定量鉴定什么的
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6楼2010-11-28 15:49:05
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llxxdl620

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by gyesang at 2010-11-28 16:53:18:
用1.3%的琼脂糖胶，加EB，然后跑胶，跟跑DNA一样，Marker用RNA的，其他没有什么特别的 附一张我跑的RNA图片



[ Last edited by gyesang on 2 ...

这个是提取的总RNA的图吗？有没有RNA Marker的图片啊
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8楼2010-11-30 14:22:12
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llxxdl620

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by ben1147 at 2010-11-28 15:46:24:
跑RNA加marker没什么用，除非是跑甲醛变性琼脂糖胶，并且用RNA marker。就算这样也没什么意思，就那么几条带，大小不用关心，直接根据RNA的带型就能分析出来问题

直接根据RNA的带型就能分析出来问题 ，RNA的带型有什么特点啊
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9楼2010-11-30 14:23:40
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llxxdl620

金虫 (小有名气)

这就是我的电泳图，从左到右，1，2泳道是10000的marker,3，4泳道是1000的marker,5，6泳道是我从细胞提的RNA的电泳
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10楼2010-11-30 14:45:16
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clare420

新虫 (小有名气)
如果连maker都跑不好那最大的可能就是胶的问题了，其实一般跑RNA都不加maker，还有就是无酶的处理，胶凝的时间够不，有的时候胶凝的不好，或浓度低都有可能跑的不好。
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11楼2010-11-30 15:51:10
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sai00fuji

金虫 (正式写手)
楼主你不会是用水配的胶吧？
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12楼2010-11-30 16:04:47
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mayerpaco

铁虫 (小有名气)
个人认为可能是胶的问题。
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13楼2010-11-30 16:29:19
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llxxdl620

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by sai00fuji at 2010-11-30 16:04:47:
楼主你不会是用水配的胶吧？

恩，是的啊，那应该用啥啊？
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14楼2010-11-30 20:21:05
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sai00fuji

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by llxxdl620 at 2010-11-30 20:21:05:



恩，是的啊，那应该用啥啊？

用缓冲液配胶。。。。
楼主好好看看电泳的原理吧。。。。
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15楼2010-12-01 00:32:20
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poog502

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by llxxdl620 at 2010-11-30 20:21:05:



恩，是的啊，那应该用啥啊？

我开始对楼主表示由衷的佩服。做分子实验还是不要擅自做主，原因你懂的!
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16楼2010-12-01 08:02:01
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