应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】DGGE中GC夹问题
51/1返回列表
查看: 2459  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

daringhong

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】DGGE中GC夹问题

请教一下，DGGE前做PCR,要在一对的引物中的一个引物一端加上长达几十个GC的发夹结构，那对于PCR的反应体系，特别是这一对引物，具有很大差别的退火温度和长度等等，这些因素对PCR反应体系是否会造成很大的影响？
我现在是先设计了一对引物，在没加GC之前先扩增了一下目的片段，感觉效果不错，然后换夹GC夹的试,就没目的条带了,不知道什么原因啊...
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

实验

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2010-11-23 11:06:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

葳蕤幽蓝

铜虫 (初入文坛)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
西瓜(金币+1): 最好另外发帖，这样关注度更高 2011-06-12 08:58:48
请教大家，我用不带夹的引物扩增，条带很好，一换带夹的就不行了，然后我用不带夹扩增出的pcr产物纯化后再用带夹的扩，结果出现了2条带，请问大家有没有遇到过这样的情况呀？实验很真实烦心呀～～
赞一下(2人) 回复此楼
5楼2011-06-11 20:46:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

葳蕤幽蓝

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
1949stone: 那就一起关注啊 2011-06-09 10:13:04
不知道楼主的问题解决了没呀？我也遇到同样的问题
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2011-06-09 10:09:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiadongliang

金虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
西瓜(金币+3): 鼓励 2011-06-12 08:58:02
一般来讲，GC夹子不影响引物的退火温度等，完全按照没有GC夹子的引物来做就好。
另外，我个人觉得，做DGGE一定要用好酶，不然扩增到GC夹子这一段GC含量很高的区域可能扩增无法继续，导致PCR挺好，但是电泳效果很差。
合成GC夹子引物也要到好的公司合成，一般公司合成这种引物的质量不能保证。
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2011-06-09 10:45:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

keke0812

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
西瓜(金币+3): 鼓励交流 2011-06-12 08:58:27
我做过,退火温度计算时完全忽略GC夹子就行了,我的是52度
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2011-06-09 11:00:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 EZ67DG6CvcKL 2026-08-31 3/150 2026-08-31 22:23 by o3EMxHUAQDtS
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 EZ67DG6CvcKL 2026-08-31 3/150 2026-08-31 22:14 by o3EMxHUAQDtS
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的？ +17 爱看书的可乐 2026-08-26 19/950 2026-08-31 21:30 by xiangy672
[基金申请] 能否申诉？ +7 echo8914667 2026-08-30 8/400 2026-08-31 17:00 by yihongxu
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗？ +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 国社科又开始会评了，不知道这次命运如何 +6 雨打竹帘 2026-08-30 10/500 2026-08-31 09:29 by huixian257
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已，这评审意见是按照杰青的条件评的吧？ +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 某些机构，以效率低为荣，以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭