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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】荧光定量 有DNA污染
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pidou213

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】荧光定量 有DNA污染

咋办呢？

我怕经过DNA酶处理一下后，RNA恐怕就讲解完了
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1楼 2010-11-17 00:06:03
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lixg

铁杆木虫 (正式写手)
★
lstt09nk(金币+1):鼓励交流 2010-11-19 10:50:10
pidou213(金币+1):谢谢啊 2010-11-20 00:52:54
哪有这么复杂啊。trizol法提取RNA后，通行的做法都是用RNase free 的DNase处理，去除基因组污染。然后进行反转录。如果还不放心，就在内含子上设计一对内参引物（跨外显子），用反转录产物做个PCR，35个循环，电泳检测，如无目的条带，就可以了。
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7楼2010-11-19 10:44:34
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lixg

铁杆木虫 (正式写手)
★
dhd997(金币+1):鼓励交流 2010-11-17 08:33:03
pidou213(金币+1):xianxiexie 2010-11-17 23:45:53
不会的，只要用RNase free 的DNase处理，不会降解RNA的。
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2楼2010-11-17 08:32:26
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bigboy123

铜虫 (小有名气)
★
lstt09nk(金币+1):鼓励交流 2010-11-17 11:17:31
那个DNA要想完全去除是不现实的，关键是要找到为什么污染和污染源在哪里，这样才是办法。
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3楼2010-11-17 09:45:58
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pidou213

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by lixg at 2010-11-17 08:32:26:
不会的，只要用RNase free 的DNase处理，不会降解RNA的。

可是操作起来会不会降解的很快呢
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4楼2010-11-17 23:45:21
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