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【求助/交流】怎样扩增已知基因序列两边的序列
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专业: 生物化学
[交流]
【求助/交流】怎样扩增已知基因序列两边的序列
已有4人参与
各位虫子们好
最近我已经有了基因的序列,我想在基因两端各再往外扩1kb左右,看看能不能找到一些调控序列什么的
请问大家有什么方法可以做啊 ?
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我还年轻,我要上路!
1楼
2010-10-27 13:15:13
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rollandyoung
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性别: GG
专业: 食用真菌学
可以尝试染色体步移
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5楼
2010-10-27 22:52:22
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brightfuture01
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专业: 神经生物学
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amisking(金币+3): 2010-10-27 19:58:58
可以考虑如下方法:
RACE(这个还是有一定的技术难度);
TAIL-PCR(这个有现成的试剂盒卖,见Takara,刘光耀等人发明的)
Inverse PCR(反向PCR也可以考虑,往往结合southern 手段来做)
当然还有一些其他的方法,比如有genome walking kit,这个往往是采用连接一个接头,然后扩增的方法。
祝好运
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The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
2楼
2010-10-27 13:39:55
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tongyanna
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专业: 水产生物遗传育种学
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小木虫(金币
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):给个红包,谢谢回帖交流
用用5‘RACE和3'RACE扩扩,一般3’好做,5‘容易出问题。
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自己的路,自己快乐的走
3楼
2010-10-27 14:54:19
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wolfebst
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注册: 2008-10-12
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专业: 环境工程
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小木虫(金币
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宝生物的Genomic Walking Kit很好用,原理是TAIL-PCR,我就用的这个试剂盒,扩了12k的基因簇
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4楼
2010-10-27 15:00:37
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