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转基因猴子

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】怎样扩增已知基因序列两边的序列已有4人参与

各位虫子们好
最近我已经有了基因的序列,我想在基因两端各再往外扩1kb左右,看看能不能找到一些调控序列什么的
请问大家有什么方法可以做啊 ?
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我还年轻,我要上路!
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rollandyoung

金虫 (小有名气)

可以尝试染色体步移
5楼2010-10-27 22:52:22
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+3): 2010-10-27 19:58:58
可以考虑如下方法:

RACE(这个还是有一定的技术难度);

TAIL-PCR(这个有现成的试剂盒卖,见Takara,刘光耀等人发明的)

Inverse PCR(反向PCR也可以考虑,往往结合southern 手段来做)

当然还有一些其他的方法,比如有genome walking kit,这个往往是采用连接一个接头,然后扩增的方法。

祝好运
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
2楼2010-10-27 13:39:55
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tongyanna

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
用用5‘RACE和3'RACE扩扩,一般3’好做,5‘容易出问题。
自己的路,自己快乐的走
3楼2010-10-27 14:54:19
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wolfebst

至尊木虫 (职业作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
宝生物的Genomic Walking Kit很好用,原理是TAIL-PCR,我就用的这个试剂盒,扩了12k的基因簇
4楼2010-10-27 15:00:37
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