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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】怎样扩增已知基因序列两边的序列
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转基因猴子

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】怎样扩增已知基因序列两边的序列 已有4人参与

各位虫子们好
最近我已经有了基因的序列，我想在基因两端各再往外扩1kb左右，看看能不能找到一些调控序列什么的
请问大家有什么方法可以做啊 ？
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我还年轻，我要上路！
1楼 2010-10-27 13:15:13
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+3): 2010-10-27 19:58:58
可以考虑如下方法：

RACE（这个还是有一定的技术难度）；

TAIL-PCR（这个有现成的试剂盒卖，见Takara，刘光耀等人发明的）

Inverse PCR（反向PCR也可以考虑，往往结合southern 手段来做）

当然还有一些其他的方法，比如有genome walking kit，这个往往是采用连接一个接头，然后扩增的方法。

祝好运
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The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
2楼2010-10-27 13:39:55
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tongyanna

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
用用5‘RACE和3'RACE扩扩，一般3’好做，5‘容易出问题。
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自己的路，自己快乐的走
3楼2010-10-27 14:54:19
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wolfebst

至尊木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
宝生物的Genomic Walking Kit很好用，原理是TAIL-PCR，我就用的这个试剂盒，扩了12k的基因簇
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4楼2010-10-27 15:00:37
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rollandyoung

金虫 (小有名气)
可以尝试染色体步移
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5楼2010-10-27 22:52:22
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