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dongfangzz

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】实时荧光定量PCR的扩增效率低该如何改进? 已有5人参与

实时荧光定量PCR(染料法)的指数扩增期曲线上升较平缓,斜率较低。分析应该是扩增效率低。做了两组标本,3个基因。Ct值最早的出现在15个循环,晚的在31个循环。

请问
斜率低的原因是什么呀?
该如何改进呢?

[ Last edited by dongfangzz on 2010-10-10 at 23:13 ]
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dongfangzz

银虫 (小有名气)

现在的讨论怎么不激烈呀
2楼2010-10-11 20:39:12
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王会征

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★
scelab(金币+2):热心虫友,欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-10-12 00:00:56
可能的原因之一是模板的拷贝数低,也就是你反转录效率不高,可以尝试更高质量RNA的提取及反转录实验。
3楼2010-10-11 20:50:39
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


scelab(金币+1):谢谢交流!:tiger06: 2010-10-12 00:01:02
重新设计引物,优化反应体系和条件,买好的试剂~
4楼2010-10-11 23:24:20
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5楼2012-05-18 22:21:02
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魔弈

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by 王会征 at 2010-10-11 20:50:39
可能的原因之一是模板的拷贝数低,也就是你反转录效率不高,可以尝试更高质量RNA的提取及反转录实验。

引物效率106%是怎么回事?
黎明前最黑暗
6楼2014-05-24 11:02:13
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