24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1786  |  回复: 15
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

lianyi1989

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】3'RACE求助

最近在做两条基因的RACE,一条已经搞定,另外一条5'也已经出来了,但是3'却一直卡着,卡了一个月了~这个3'已经出条带了,但是测序总不对,有polyA和UPM,但是找不到上游引物,和原来的序列也拼接不上,重做了两次,测序结果都是这样...然后就重新设计引物,已经5条了,但是就是弥散,连条带都没有了~ cDNA应该是没问题的,因为另外一条基因都出结果了,用的clontech的smarter的盒子,程序和体系都是按说明说上推荐来的,也应该不会有什么问题,现在真不知道是哪有问题,请各位虫友们给给意见,急死了~另外,我这3'真是做不出来的话,有没有别方法可以得到全长?我的基因全长是1600bp左右,现在已经得到了1200多了,就差3'那边的300—400bp的了。谢谢大家啦~
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

suguolian

新虫 (初入文坛)


lianyi1989(金币+1): 谢谢参与
我做的是3’-RACE,用的invitrogen的M-MLV RT反转录试剂盒做,引物是特异性引物与oligo dT加尾,这样能做出来吗?求各位虫友帮忙……不胜感激
7楼2013-09-11 10:25:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答

lhwei1987

铁杆木虫 (正式写手)


lianyi1989(金币+1):谢谢参与
用inner扩下,或者用polyT试试,不行tail也做做
2楼2010-10-04 21:45:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lianyi1989

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by lhwei1987 at 2010-10-04 21:45:43:
用inner扩下,或者用polyT试试,不行tail也做做

谢谢,不过能不能详细说明下,不是很懂~ps:我是新手...无限感激了
4楼2010-10-05 10:29:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

大白菜123789

铜虫 (小有名气)


lianyi1989(金币+1):谢谢参与
换引物,找保守区的引物试试!
5楼2010-10-05 15:39:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂推荐 材料 304 +12 荷包蛋hyj 2026-03-26 12/600 2026-03-27 14:46 by laoshidan
[考研] 一志愿北京化工大学 070300 学硕 336分 求调剂 +8 vv迷 2026-03-22 8/400 2026-03-27 13:09 by 253863592
[考研] 一志愿武汉理工,总分321,英一数二,求老师收留。 +5 nnnnnnn5 2026-03-25 5/250 2026-03-27 04:42 by wxiongid
[考研] 343求调剂 +4 赠我一本书 2026-03-23 4/200 2026-03-27 00:40 by wxiongid
[考研] 336材料求调剂 +7 陈滢莹 2026-03-26 9/450 2026-03-27 00:20 by wxiongid
[考研] 071000生物学求调剂,初试成绩343 +6 小小甜面团 2026-03-25 6/300 2026-03-26 23:01 by 不吃魚的貓
[考研] 349求调剂 +4 李木子啊哈哈 2026-03-25 4/200 2026-03-26 22:49 by fmesaito
[考研] 一志愿华理,数一英一285求A区调剂 +8 AZMK 2026-03-25 10/500 2026-03-26 22:37 by 学员8dgXkO
[考研] 324求调剂 +4 wysyjs25 2026-03-21 4/200 2026-03-26 20:38 by fmesaito
[考研] 一志愿厦门大学化学学硕307求调剂 +8 y7czhao 2026-03-26 8/400 2026-03-26 19:51 by 不吃魚的貓
[考研] 一志愿河工大 081700 276求调剂 +4 地球绕着太阳转 2026-03-23 4/200 2026-03-26 14:27 by zzll406
[考研] 296求调剂 +5 www_q 2026-03-20 5/250 2026-03-26 12:56 by 3Strings
[考研] 材料调剂 +3 iwinso 2026-03-23 3/150 2026-03-25 11:29 by greychen00
[考研] 材料专硕找调剂 +5 哈哈哈吼吼吼哈 2026-03-23 5/250 2026-03-24 19:07 by 了了了了。。
[考研] 求调剂 +7 十三加油 2026-03-21 7/350 2026-03-23 23:48 by 热情沙漠
[考研] 材料/农业专业,07/08开头均可,过线就行 +3 呵唔哦豁 2026-03-23 4/200 2026-03-23 22:30 by 汪!?!
[考研] 接收2026硕士调剂(学硕+专硕) +4 allen-yin 2026-03-23 6/300 2026-03-23 15:04 by 汪!?!
[考研] 一志愿东华大学化学070300,求调剂 +7 2117205181 2026-03-21 8/400 2026-03-22 22:55 by chixmc
[考研] 石河子大学(211、双一流)硕博研究生长期招生公告 +3 李子目 2026-03-22 3/150 2026-03-22 21:01 by 怎么释怀
[考研] 求调剂一志愿海大,0703化学学硕304分,有大创项目,四级已过 +6 幸运哩哩 2026-03-22 10/500 2026-03-22 20:10 by edmund7
信息提示
请填处理意见