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lianyi1989金虫 (小有名气)
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[交流]
【求助/交流】3'RACE求助
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| 最近在做两条基因的RACE,一条已经搞定,另外一条5'也已经出来了,但是3'却一直卡着,卡了一个月了~这个3'已经出条带了,但是测序总不对,有polyA和UPM,但是找不到上游引物,和原来的序列也拼接不上,重做了两次,测序结果都是这样...然后就重新设计引物,已经5条了,但是就是弥散,连条带都没有了~ cDNA应该是没问题的,因为另外一条基因都出结果了,用的clontech的smarter的盒子,程序和体系都是按说明说上推荐来的,也应该不会有什么问题,现在真不知道是哪有问题,请各位虫友们给给意见,急死了~另外,我这3'真是做不出来的话,有没有别方法可以得到全长?我的基因全长是1600bp左右,现在已经得到了1200多了,就差3'那边的300—400bp的了。谢谢大家啦~ |
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lianyi1989
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