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xiaoru2010

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[交流] 【求助/交流】RACE特异引物不够特异已有4人参与

做了3‘、5’RACE，一次出带，但克隆测序结果为同类但不是我要的基因，因此要重新设计引物。将之前特异引物扩到的1035片段比对后，前175和850以后都是特异片段，因此在850-1035之间设计3‘RACE特异引物，将设计出的引物BLAST，下面还是有很多同源性很高的基因（连住十几个都相同的碱基），但都是人类还有其他动物的基因，我做的是草莓成花基因，请问高手这样的引物算特异吗？？？去做RACE会不会扩出人类基因，高手快出现吧

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1楼 2010-08-02 18:26:57

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linxi8579

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Originally posted by xiaoru2010 at 2010-08-02 18:26:57:
做了3‘、5’RACE，一次出带，但克隆测序结果为同类但不是我要的基因，因此要重新设计引物。将之前特异引物扩到的1035片段比对后，前175和850以后都是特异片段，因此在850-1035之间设计3‘RACE特异引物，将设计出 ...

你扩草莓的，如果在自身的基因组里没有错配只是人里有错配的话那模板制备时谨慎一点啊。