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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】RACE特异引物不够特异
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xiaoru2010

[交流] 【求助/交流】RACE特异引物不够特异 已有4人参与

做了3‘、5’RACE，一次出带，但克隆测序结果为同类但不是我要的基因，因此要重新设计引物。将之前特异引物扩到的1035片段比对后，前175和850以后都是特异片段，因此在850-1035之间设计3‘RACE特异引物，将设计出的引物BLAST，下面还是有很多同源性很高的基因（连住十几个都相同的碱基），但都是人类还有其他动物的基因，我做的是草莓成花基因，请问高手这样的引物算特异吗？？？去做RACE会不会扩出人类基因，高手快出现吧
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1楼 2010-08-02 18:26:57
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xiaoru2010

谢谢各位了，但是之前我用兼并引物扩一些100多bp的保守区小片段时就扩出人的基因来了……
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5楼2010-08-03 08:12:17
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xiaoru2010

引用回帖:
Originally posted by fungixx at 2010-08-05 13:44:15:
呵呵　你多设计几条GSP吧 做巢式pcr吧

第一次结果又带也要巢式吗？我第一遍P完是很清晰的一条带，一点弥散都没有，再巢式也不会有结果吧
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8楼2010-08-06 10:38:43
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