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lhm_hnyj

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】引物设计需验证吗? 已有5人参与

小虫下了Primer 5,鼓捣了很久才可以运行起来,都还不会用呢。结果刚又听说不要自己设计,否则发文章的时候需要验证,全世界买菌种来验证自己的引物是可行的,工作量相当的大,弄得我很是纠结啊。我现在只是想通过已有的同属几个品种的序列设计特异引物,将这几个种加以鉴别,而文献报道的大多是用通用引物进行扩增,大家能给小虫些建议吗,到底该不该自己设计引物,真的需大量验证吗?
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green1223

木虫 (职业作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
怎么没人回答????、
2楼2010-09-18 22:30:02
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sfxt001

木虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你说的是什么引物啊?16S的?
3楼2010-09-18 22:46:49
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lhm_hnyj

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by sfxt001 at 2010-09-18 22:46:49:
你说的是什么引物啊?16S的?

是真菌ITS的
4楼2010-09-19 08:28:23
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魑魅-魍魉

新虫 (正式写手)

外面去设计引物又不贵,方便经济又实惠,错误少效果少,楼主何必呢,不过你想设计没人拦得住啊,对吧?! 按照自己的意愿走呗
风中摇曳的颤枝,何处是归根?
5楼2010-09-19 08:56:49
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lhm_hnyj

金虫 (小有名气)

[quote]Originally posted by 魑魅-魍魉 at 2010-09-19 08:56:49:
外面去设计引物又不贵,方便经济又实惠,错误少效果少,楼主何必呢,不过你想设计没人拦得住啊,对吧?! 按照自己的意愿走呗 [/quo
呵呵,我想您是误解我的意思了,也难怪,因为我们学化学出身,现在实验室基本就是我一个人,带我的老师基本不去,也是学植化的,老以为这些必须是自己来干的。稍微咨询了下公司,说是可以免费设计,这下我可乐坏了
6楼2010-09-19 20:56:17
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魑魅-魍魉

新虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by lhm_hnyj at 2010-09-19 20:56:17:
[quote]Originally posted by 魑魅-魍魉 at 2010-09-19 08:56:49:
外面去设计引物又不贵,方便经济又实惠,错误少效果少,楼主何必呢,不过你想设计没人拦得住啊,对吧?! 按照自己的意愿走呗 [/quo
呵 ...

那可真是恭喜楼主了,我们都是老师直接联系的。祝你早日出成果
风中摇曳的颤枝,何处是归根?
7楼2010-09-20 07:07:21
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xiaoyu1014126

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by lhm_hnyj at 2010-09-17 09:36:22:
小虫下了Primer 5,鼓捣了很久才可以运行起来,都还不会用呢。结果刚又听说不要自己设计,否则发文章的时候需要验证,全世界买菌种来验证自己的引物是可行的,工作量相当的大,弄得我很是纠结啊。我现在只是想通过 ...

拿引物扩一下,大小片段对了,再测序下,比对一下,就OK了啊
8楼2010-09-23 13:53:40
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green1223

木虫 (职业作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by xiaoyu1014126 at 2010-09-23 13:53:40:


拿引物扩一下,大小片段对了,再测序下,比对一下,就OK了啊

你是说拿引物PCR后,跑电泳,完了再测一下序吗
9楼2010-09-23 14:06:39
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xiaoyu1014126

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by green1223 at 2010-09-23 14:06:39:

你是说拿引物PCR后,跑电泳,完了再测一下序吗

是的,因为电泳只能说明片段大小,测序说明你的引物的特异性
10楼2010-09-24 08:59:18
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