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dongfangzz

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】PCR后的DNA产物跑电泳久了条带为什么会消失或变弱? 已有9人参与

我用RNA逆转录cDNA后,又做了PCR。当产物跑电泳25分钟,曝光观察条带清晰。但感觉没充分跑开,有接着跑了6分钟.条带几乎消失了,marker中的几个条带个别的也消失了。
为什么这样子?难道DNA降解了?
一次跑电泳后:
http://g.zhubajie.com/urllink.php?id=9904601ilr1sawczuqcllq6
二次电泳后:
http://g.zhubajie.com/urllink.php?id=9904602bqv5qj1w5xtuexis
确定第二次不是曝光的问题

[ Last edited by dongfangzz on 2010-9-12 at 09:38 ]
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★
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amisking(金币+1): 2010-09-12 15:40:32
因为紫外会淬灭EB……重新染一下就可以了
(没看附件,其他的荧光染料也会被淬灭的,程度上可能有差异)
3楼2010-09-12 10:25:14
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linysm

银虫 (小有名气)

胶跑热了吧,散开了,DNA溜了。
10楼2010-09-12 16:50:12
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普通回帖

bigboy123

铜虫 (小有名气)

★ ★
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amisking(金币+1):鼓励交流 2010-09-12 15:40:28
感觉是电泳的问题,是不是loading buffer加多了,被盖住了。
供应PCR增量剂
2楼2010-09-12 10:01:42
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dongfangzz

银虫 (小有名气)

在这里先谢谢大家了!
4楼2010-09-12 15:11:51
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杜杜

金虫 (小有名气)


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重新染色试试
5楼2010-09-12 15:43:25
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dongfangzz

银虫 (小有名气)

怎么重新染色呀?
重新加样跑电泳?
6楼2010-09-12 15:53:49
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lixiaomin8611

金虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
直接用EB染液染胶啊
7楼2010-09-12 16:01:41
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dongfangzz

银虫 (小有名气)

整块胶都要染吗
还是只染条带处
8楼2010-09-12 16:03:50
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feiye2214

木虫 (正式写手)

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lstt09nk(金币+2):感谢回复,希望对楼主有所帮助~ 2010-09-12 17:13:55
把整块胶都扔进EB溶液中染呗,我们这边都是这样染的,不在胶中加EB,跑胶后把胶块放进EB染15-20min就好
这样,电泳槽就不会被EB污染了,只是多耗点时间
9楼2010-09-12 16:47:18
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